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CSTR:16397.09.0C09000038 A/Anhui/1/2013(H7N9)滴鼻途径感染布氏田鼠模型 A/Anhui/1/2013 (H7N9) virus intranasally infected Brandt’s voles model

人感染H7N9 禽流感病毒后,临床表现包括发热、咳嗽、呼吸困难、乏力、肌肉酸痛、咯血及胃肠道症状,初始症状并不包括鼻塞和流涕。97%的患者出现肺炎,超过70%的患者发生急性呼吸窘迫综合症(ARDS),部分患者继而进展为顽固性低氧血症和多器官功能衰竭并导致最终死亡。少数病例为轻症,均为儿童,常常仅有发热表现。实验室检测结果显示,患者外周血白细胞正常或减少,淋巴细胞减少,血小板缺乏,以及肝酶轻度升高。约60%的病例具有各种并发症,如冠心病、糖尿病、高血压和慢性阻塞性肺病。病例以老年人(平均年龄62 岁)和男性(69%)居多。 研究显示,活禽市场是人感染H7N9 禽流感病毒的可能来源。活禽暴露是人感染的关键风险因素,导致患者感染的主要暴露方式为直接接触染毒的活禽、被其排泄物污染的环境或物品。然而,目前从不同患者体内分离到的病毒株基因组序列存在一定的差异,其进化源头似乎并不相同,因此目前报道的这些病例极有可能是一些独立的感染事件。流行病学调查也为这一论点提供了部分佐证。目前已确诊的人感染病例多为散发,彼此间没有明显的流行病学关联。尽管如此,目前仍有三起疑似家庭聚集案例的报道。

CSTR:16397.09.0C03000033 A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011 (H5N1) 气溶胶感染雪貂模型 A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011 (H5N1) aerosol route infected ferret model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011禽流感病毒,经血凝抑制(HI)实验,筛选出6月龄以下对当下流行的H1N1、H3N2、H5N1、H7N9亚型流感病毒相应血清抗体均为阴性的去势雪貂。为了使动物适应并降低应激反应,所有雪貂均在感染前一周进行体温芯片的皮下植入和实验室适应(使用扫描仪监测体温,BMDS, USA)。感染组通过肌肉注射盐酸塞拉嗪对雪貂进行麻醉,轻度麻醉后感染组每只雪貂经鼻接种病毒。在感染后第24小时,将每只接种过的动物和幼稚的雪貂分别饲养在传播笼中,以测试病毒的传播能力。观察所有动物的临床体征,每天称重作为疾病的指标。分别在感染后第1、3、5、7和9天或暴露后从已接种和未接种过的动物收集鼻拭子和咽拭子,并转移至1 ml PBS中。通过在MDCK细胞中的终点滴定确定病毒滴度。

Xu L, Bao L, Yuan J, et al. Antigenicity and transmissibility of a novel clade 2.3.2.1 avian influenza H5N1 virus. J Gen Virol.2013 Dec;94(Pt 12):2616-26.

CSTR:16397.09.0C03000032 A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011 (H5N1) 滴鼻感染雪貂模型 A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011 (H5N1) virus-intranasally infected ferret model

A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011 (H5N1) virus-intranasally infected ferret model

病毒株为A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011禽流感病毒,经血凝抑制(HI)实验,筛选出6月龄以下对当下流行的H1N1、H3N2、H5N1、H7N9亚型流感病毒相应血清抗体均为阴性的去势雪貂。为了使动物适应并降低应激反应,所有雪貂均在感染前一周进行体温芯片的皮下植入和实验室适应(使用扫描仪监测体温,BMDS, USA)。感染组通过肌肉注射盐酸塞拉嗪对雪貂进行麻醉,轻度麻醉后感染组每只雪貂经鼻接种病毒。分别在感染后第1、3、5、7和9天或暴露后从已接种和未接种过的动物收集鼻拭子和咽拭子,并转移至1 ml PBS中。

CSTR:16397.09.0C03000035 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) 气溶胶感染雪貂模型 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) aerosol route infected ferret model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004禽流感病毒,经血凝抑制(HI)实验,筛选出6月龄以下对当下流行的H1N1、H3N2、H5N1、H7N9亚型流感病毒相应血清抗体均为阴性的去势雪貂。为了使动物适应并降低应激反应,所有雪貂均在感染前一周进行体温芯片的皮下植入和实验室适应(使用扫描仪监测体温,BMDS, USA)。感染组通过肌肉注射盐酸塞拉嗪对雪貂进行麻醉,轻度麻醉后感染组每只雪貂经鼻接种病毒。在感染后第24小时,将每只接种过的动物和幼稚的雪貂分别饲养在传播笼中,以测试病毒的传播能力。观察所有动物的临床体征,每天称重作为疾病的指标。分别在感染后第1、3、5、7和9天或暴露后从已接种和未接种过的动物收集鼻拭子和咽拭子,并转移至1 ml PBS中。通过在MDCK细胞中的终点滴定确定病毒滴度。

Xu L, Bao L, Yuan J, et al. Antigenicity and transmissibility of a novel clade 2.3.2.1 avian influenza H5N1 virus. J Gen Virol.2013 Dec;94(Pt 12):2616-26.

CSTR:16397.09.0C03000034 A/Vietnam/1194/2004(H5N1) 滴鼻感染雪貂模型 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) virus intranasally infected ferret model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004禽流感病毒,经血凝抑制(HI)实验,筛选出6月龄以下对当下流行的H1N1、H3N2、H5N1、H7N9亚型流感病毒相应血清抗体均为阴性的去势雪貂。为了使动物适应并降低应激反应,所有雪貂均在感染前一周进行体温芯片的皮下植入和实验室适应(使用扫描仪监测体温,BMDS, USA)。感染组通过肌肉注射盐酸塞拉嗪对雪貂进行麻醉,轻度麻醉后感染组每只雪貂经鼻接种病毒。分别在感染后第1、3、5、7和9天或暴露后从已接种和未接种过的动物收集鼻拭子和咽拭子,并转移至1 ml PBS中。

Xu L, Bao L, Yuan J, et al. Antigenicity and transmissibility of a novel clade 2.3.2.1 avian influenza H5N1 virus. J Gen Virol.2013 Dec;94(Pt 12):2616-26.

CSTR:16397.09.0C03000037 A/ Vietnam/1203/2004(H5N1)滴鼻途径感染雪貂模型 A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) virus intranasally infected ferret model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

该研究项目在BSL-3 实验室中进行。病毒株为H5N1 A/ Vietnam/1203/2004,雪貂经过轻度麻醉后滴鼻感染病毒。实验的观察期为5天。皮下植入体温芯片用于监测体温、体重变化。每日观察雪貂临床症变化,在感染后第5天处死动物,取组织样本用于监测病毒复制动力曲线和动物感染后组织炎症反应检查。

1.Xu L, Bao L, Li F, Gu S, Lv Q, Yuan J, Xu Y, Zhu H, Deng W, Li Y, Yao Y, Yu P, Gao Z, Qin C. Combinations of Oseltamivir and Fibrates Prolong the Mean Survival Time of Mice Infected with the Lethal H7N9 Influenza Virus. J Gen Virol. 2015, 96:46-51 2.鲍琳琳, 占玲俊, 邓巍, 许黎黎, 朱华, 吕琦, 李枫棣, 秦川. 建立H5N1流感病毒感染雪貂动物模型.中国比较医学杂志。2011,9:44-48

CSTR:16397.09.0C01000030 A/ Vietnam/1203/2004(H5N1)滴鼻途径感染BALB/c小鼠模型 A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) virus intranasally infected BALB/c mouse model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为H5N1 A/Vietnam/1203/2004,小鼠经过轻度麻醉后滴鼻感染病毒。小鼠感染后观察14天,监测体重变化率。感染后分时间段处死小鼠,每个时间点收集相同数量小鼠肺、脾、脑、心等组织,进行病毒滴度测定和组织病理学检查。

1.Bao L, Xu L, Zhu H, Deng W, Chen T, Lv Q, Li F, Yuan J, Xu Y, Huang L, Li Y, Liu J, Yao Y, Yu P, Chen H, Qin C. Transmission of H7N9 influenza virus in mice by different infective routes. Virology Journal, 2014, 11:185 2.Xu L, Bao L, Yuan J, Li F, Lv Q, Deng W, Xu Y, Yao Y, Yu P, Chen H, Yuen KY, Qin C. Antigenicity and transmissibility of a new clade 2.3.2.1 avian influenza H5N1 virus. Journal of General Virology. 2013, 94, 2616–2626

CSTR:16397.09.0C11000031 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)经气管途径感染猪模型 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) virus intratracheally infected pig model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004,经血凝抑制(HI)实验,筛选出4周龄以下对当下流行的人流感病毒和猪流感病毒相应血清抗体均为阴性的SPF级巴马小型猪。 实验猪经过轻度麻醉后待肌肉彻底放松,将其放置仰卧位,用喉镜撑开会厌,通过气管插管将H7N9病毒液滴入上呼吸道。感染后观察临床症状,监测存活率及体重变化率。感染后5d处死,收集肺组织,进行肺组织载量检测和病理学检查。

CSTR:16397.09.0C06000036 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)经气管途径感染食蟹猴模型 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)virus intratracheally infected cynomolgus macaques model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

食蟹猴年龄5岁,雄性,2只。H5N1、H1N1和季节性流感病毒抗体经检测均呈阴性。实验前恒河猴麻醉后将体温芯片植入其颈部后方、肩胛骨上方的背中线位置,每天用数据收集器扫描芯片来测量猴的体温。实验的观察期为5天。皮下植入体温芯片用于监测体温、体重变化。食蟹猴轻度麻醉后经气管感染A/Vietnam/1194/2004(H5N1)病毒。每日观察食蟹猴临床症变化,在感染后第0、3、6、9、14天取血测定白细胞总数和CD4+、CD8+比值;并于感染后3、6、9、14天各解剖一只食蟹猴取肺组织进行H5N1病毒的测定和分离。

CSTR:16397.09.0C09000029 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)滴鼻途径感染布氏田鼠模型 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) virus intranasally infected Brandt’s voles model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004,布氏田鼠经过轻度麻醉后滴鼻感染病毒。感染后观察14天,监测存活率及体重变化率。感染后2、4、6、8天处死田鼠,取田鼠肺组织,进行病毒载量检测和组织病理学检查。

CSTR:16397.09.0C02000028 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)滴鼻途径感染Lewis大鼠模型 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) virus intranasally infected Lewis rat model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004禽流感病毒。感染组大鼠在感染后2、4、6、8天各解剖一只进行尸检,测定肺部H5N1病毒RNA和滴度,并同时进行病理学检测。

CSTR:16397.09.0C16000027 A/SZ/406H/2006(H5N1)经气管途径感染恒河猴模型 A/SZ/406H/2006(H5N1) virus intratracheally infected rhesus monkey model

H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。

恒河猴年龄5岁,雄性,2只。H5N1、H1N1 和季节性流感病毒抗体经检测均呈阴性。实验前恒河猴麻醉后将体温芯片植入其颈部后方、肩胛骨上方的背中线位置,每天用数据收集器扫描芯片来测量猴的体温。实验的观察期为5天。皮下植入体温芯片用于监测体温、体重变化。恒河猴经轻度麻醉后,经气管镜感染H5N1(A/SZ/406H/2006),每日观察恒河猴临床症变化,在感染后第5天处死动物,取组织样本用于监测病毒复制动力曲线和动物感染后组织炎症反应检查。

吕琦,邓巍,鲍琳琳,et al.气管插管法接种H5N1病毒感染恒河猴及系统组织病毒检测[J].中国比较医学杂志,2011,21(12):56-60.