脱髓鞘疾病，是一类由遗传性遗传因素、病毒感染或自身免疫等因素造成神经纤维的髓鞘脱失造成的疾病，髓鞘的脱失会使神经冲动的传送受到影响，会导致肢体颤抖、运动共济失调、多发性硬化以及癫痫。病变部位主要在脊髓、小脑、脑干。 这类疾病主要表现为肢体无力、平感觉异常、进行性肢体协调运动障碍、眼部症状等，并可伴有复杂的神经系统损害，亦可伴大脑皮质功能损害如认知功能障碍和（或）精神行为异常等。病理特征主要表现为神经纤维髓鞘破坏，病灶呈多发性播散，分布于中枢神经的白质，沿小静脉周围炎症细胞浸润。神经细胞/轴突以及支持组织相对完成。该类疾病的发病高峰为二到三周，若治疗延误受损神经继发缺血变性则发生多发性硬化，发病严重时可侵犯脊髓前角细胞和脑干神经核以及大脑运动皮质锥体细胞危及生命。 该疾病的发病率较高，倾向于年轻人患病，中国预测枚10万人约有2人发病，我国人口基数较大，因此该类疾病仍是一个非常严峻的问题。发病机制总结如下图所示。 诊断方法包括（1）脑脊液（CSF）检查，IgG鞘内合成检测；（2）诱发电位检测，脱髓鞘病变使得神经传导速度减慢，潜伏期延长、拨付降低；（3）MRI检查。 药物治疗，主要是通过抑制炎性脱髓鞘病变进展，防止疾病其病变恶化，晚期对症支持疗法，减轻神经功能障碍带来的痛苦。治疗药物主要包括（1）皮质类固醇，如甲基泼尼松龙、泼尼松、IFN-β1a& IFN-β1b重组制剂、硫唑嘌呤、醋酸格拉太米尔等。

利用CRISPR/Cas9技术制备MBP敲除大鼠。在MBP基因起始密码子之前插入Cre重组酶，来构建MBP-Cre大鼠(SD.MBP(tm-Cre)-GC/ILAS)。该模型与Cre 报告大鼠进行杂交(SD.Rosa26(tm-imCherry)-GC/ILAS)，可以检测MBP基因的表达图谱，同时通过杂合子交配的方式可以获得该基因敲除的纯合子大鼠，使用PCR方法进行基因型鉴定，使用Western blot技术进行蛋白水平敲除效率的鉴定。 （1）设计方案 图 1. MBP-Cre大鼠模型构建设计方案

肥厚型心肌病

利用定点突变技术分别制备人TNNC基因的D145E突变体，随后插入心肌特异性表达启动子a-MHC下游构建人TNNC D145E基因转基因载体，通过显微注射法建立转基因C57BL/6小鼠。

高珊，陈炜，刘宁，葛文萍，高翔，吕丹，张连峰，董伟；人心肌肌钙蛋白C两种突变转基因小鼠模型建立与对比分析；中国比较医学杂志；2014年3月；第24卷第3期。

扩张型心肌病

利用定点突变技术分别制备人TNNC基因的G159D突变体，随后插入心肌特异性表达启动子a-MHC下游构建人TNNC G159D基因转基因载体，通过显微注射法建立转基因C57BL/6小鼠。

高珊，陈炜，刘宁，葛文萍，高翔，吕丹，张连峰，董伟；人心肌肌钙蛋白C两种突变转基因小鼠模型建立与对比分析；中国比较医学杂志；2014年3月；第24卷第3期。

阿尔茨海默病（AD）是发生于老年和老年前期，以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变，临床上表现为记忆障碍，失语，失认，视空间能力损害，抽象思维和计算力损害，人格和行为改变等。

使用剖宫产净化方法建立无菌APPswe/PS1ΔE9(PAP)双转基因小鼠模型。

朱华,郭亚茜,杜晓鹏,李卓,秦川；无菌 APPswe/ PS1ΔE9 双转基因小鼠模型建立及 脑内斑块变化初步观察；中国实验动物学报 2019 年 8 月第 27 卷第 4 期；521-526。

扩张型心肌病是一种以心腔(左心室和／或右心室)扩张、心肌收缩功能受损为主要特征的原因不明的心肌疾病，是除冠心病和高血压以外导致心力衰竭的主要病因之一。

人WIF-1基因插入心脏特异表达的 a-MHC启动子下游，构建WIF-1转基因表达载体，用显微注射法将线性化的转基因表达载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中。

周文君，董 伟，全雄志，张连峰; WIF一1心脏特异表达转基因小鼠心脏功能分析; 中国比较医学杂志; 2009年1O月 第19卷第1O期; 19-31

肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy， HCM)在病理上有三个特点，分别是心肌肥大、心肌细胞排列紊乱和间质纤维化。引起家族性肥厚型心肌病的分子机制主要是基因缺陷，占发病的50％ ，其病理生理机制，主要包括肌小节蛋白基因突变引起的收缩力产生缺陷；细胞骨架蛋白基因突变引起的收缩力传递缺陷；ATP调节蛋白基因突变引起的心肌能量不足；以及改变的Ca2 可利用性和 改变的肌纤维C 敏感性引起的Ca2 内稳态异常。

小鼠Meox1基因插入心脏特异表达的 a-MHC启动子下游，构建Meox1转基因表达载体，用显微注射法将线性化的转基因表达载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中。

DanLu,JizhengWang,JingLi,FeifeiGuan,XuZhang,WeiDong,NingLiu,ShanGao,LianfengZhang；Meox1 accelerates myocardial hypertrophic decompensation through Gata4. Cardiovascular Research (2018)114,300–311.

扩张型心肌病是一种以心腔(左心室和／或右心室)扩张、心肌收缩功能受损为主要特征的原因不明的心肌疾病，是除冠心病和高血压以外导致心力衰竭的主要病因之一。

人FAM55A基因插入心脏特异表达的 a-MHC启动子下游，构建FAM55A转基因表达载体，用显微注射法将线性化的转基因表达载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中。

张 丽，全雄志，董 伟，高 翔，刘 宁，徐艳峰，张连峰；心脏特异表达人源FAM55 A转基因小鼠的建立；中国比较医学杂志；2011年9月 第2l卷第9期；1-5；

心脏病（heart disease）是心脏发生病变的疾病总称，是一种常见的心内科疾病，由心脏结构受损或功能异常引起。

人CNN1基因插入心脏特异表达的 a-MHC启动子下游，构建CNN1转基因表达载体，用显微注射法将线性化的转基因表达载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中。

DanLu,LiZhang,DanBao,YingdongLu,XuZhang,NingLiu,WenpingGe,XiangGao,HongliangLi,LianfengZhang；Calponin1 inhibits dilated cardiomyopathy development in mice through the εPKC pathway；International Journal of Cardiology；173(2014)146–153.

新型冠状病毒肺炎起病以发热为主要的临床表现，可合并轻度干咳、乏力、呼吸不畅、腹泻等症状，流涕、咳痰等，咯痰症状少见。一半患者在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。部分患者起病症状轻微，可无发热等临床症状，多在1周后恢复。多数患者预后良好，少数患者病情危重，甚至死亡。从影像学表现来看，早期呈现多发小斑片影及间质改变，以肺外带明显。进而发展为双肺多发磨玻璃影、浸润影，严重者可出现肺实变，胸腔积液少见。从免疫学表现来看，患者还可出现发病早期外周血白细胞总数正常或减低、淋巴细胞计数减少，部分患者出现肝酶、肌酶和肌红蛋白增高。多数患者C反应蛋白和血沉升高，降钙素原正常。严重者D-D二聚体升高，淋巴细胞进行性减少。从组织病理学表现来看，患者表现为间质性肺炎，肺泡腔大量的多核巨细胞和巨噬细胞浸润，肺泡比弥漫性增厚，肺泡间隔增宽。

3岁至5岁的雄性恒河猴，所有的结核病和猿猴免疫缺陷病毒均为阴性。用10 6 TCID 50通过眼结膜途径接种两只雄性恒河猴。

新型冠状病毒肺炎起病以发热为主要的临床表现，可合并轻度干咳、乏力、呼吸不畅、腹泻等症状，流涕、咳痰等，咯痰症状少见。一半患者在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。部分患者起病症状轻微，可无发热等临床症状，多在1周后恢复。多数患者预后良好，少数患者病情危重，甚至死亡。从影像学表现来看，早期呈现多发小斑片影及间质改变，以肺外带明显。进而发展为双肺多发磨玻璃影、浸润影，严重者可出现肺实变，胸腔积液少见。从免疫学表现来看，患者还可出现发病早期外周血白细胞总数正常或减低、淋巴细胞计数减少，部分患者出现肝酶、肌酶和肌红蛋白增高。多数患者C反应蛋白和血沉升高，降钙素原正常。严重者D-D二聚体升高，淋巴细胞进行性减少。从组织病理学表现来看，患者表现为间质性肺炎，肺泡腔大量的多核巨细胞和巨噬细胞浸润，肺泡比弥漫性增厚，肺泡间隔增宽。

SARS-CoV-2（原2019-nCoV, HB-01），由中国疾控中心谭文杰教授提供，通过滴鼻的方式感染人 hACE2 基因的小鼠，感染剂量1× 105 TCID50 只，感染体积50 μl 只。

[1]. Zhu, N., et al., A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019. New England Journal of Medicine, 2020. [2]. Wang, C., et al., A novel coronavirus outbreak of global health concern. The Lancet, 2020. [3]. Lu, R., et al., Genomic characterisation and epidemiology of 2019 novel coronavirus: impli cations for virus origins and receptor binding. The Lancet, 2020. [4]. Yang XH 1, et al., Mice transgenic for human angiotensin converting en zyme 2 provide a model for SARS coronavirus infection. Comp 2007 Oct;57(5):450 9.

新型冠状病毒肺炎起病以发热为主要的临床表现，可合并轻度干咳、乏力、呼吸不畅、腹泻等症状，流涕、咳痰等，咯痰症状少见。一半患者在一周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。部分患者起病症状轻微，可无发热等临床症状，多在1周后恢复。多数患者预后良好，少数患者病情危重，甚至死亡。从影像学表现来看，早期呈现多发小斑片影及间质改变，以肺外带明显。进而发展为双肺多发磨玻璃影、浸润影，严重者可出现肺实变，胸腔积液少见。从免疫学表现来看，患者还可出现发病早期外周血白细胞总数正常或减低、淋巴细胞计数减少，部分患者出现肝酶、肌酶和肌红蛋白增高。多数患者C反应蛋白和血沉升高，降钙素原正常。严重者D-D二聚体升高，淋巴细胞进行性减少。从组织病理学表现来看，患者表现为间质性肺炎，肺泡腔大量的多核巨细胞和巨噬细胞浸润，肺泡比弥漫性增厚，肺泡间隔增宽。

3岁至5岁的雄性恒河猴，所有的结核病和猿猴免疫缺陷病毒均为阴性。用10 6 TCID 50通过气管途径接种两只雄性恒河猴。

2002年在中国广东爆发的严重急性呼吸综合征（Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS）波及全世界34个国家。2003年4月16日，世界卫生组织根据包括中国内地和香港地区，加拿大、美国在内的11个国家和地区的13个实验室通力合作研究的结果，宣布重症急性呼吸综合征的病因是一种新型的冠状病毒，称为SARS冠状病毒。SARS早期(1~3d），不断释放到血液中SARS-CoV，引起病毒血症。临床上，表现为发热、畏寒、头痛、肌痛等症状。从SARS疾病的起始，淋巴细胞就受到了SARS-CoV的侵袭，因此，患者的外周血淋巴细胞数目减少是诊断SARS的重要指标。SARS轻症患外周血CD3+、CD4+、 CD8+数恢复正常；重症患者呈持续下降。所有死亡SARS患者尸解标本中，脾、淋巴结、扁桃体和肠道的淋巴组织萎缩，淋巴细胞大量减少，呈现出耗竭状态。在数周到2个月时间内，SARS-CoV对重症SARS患者免疫器官的损伤程度达到了艾滋病晚期水平。由于患者发生免疫缺陷，因此，发生机会性感染的发病率在本组病例中高达50%。 陷窝蛋白-1在呼吸道上皮细胞内高表达，SARS-CoV感染造成多组织脏器损伤，以肺损伤最突出。初始在肺组织中复制增值的SARS-CoV、经血重新进入肺的SARS-CoV和渗出到肺组织中的淋巴细胞、单核细胞本身携带的SARS-CoV在肺内聚积、增殖，不断加重肺损伤。这种损伤具有连续性、弥漫性、严重性的特点，导致广泛性肺泡上皮细胞和血管内皮细胞损伤，大量蛋白性液体、纤维蛋白、炎症细胞渗出和炎症介质的过量释放，造成了肺内毛细血管的通透性显著增加，最后引起弥漫性肺泡损伤（diffuse alveolar damage, DAD）发生。此时，疾病陷入进展期（4~9d）。在进展期，与肺部的病理改变相对应，患者出现咳嗽、气促、胸闷和呼吸困难等呼吸系统症状。X线检查，肺内早期病变是两肺下野出现斑片状阴影。病情继续发展，到达极期（10~14d），患者出现严重呼吸困难，甚至发生急性呼吸窘迫综合征。X线下，进展期和极期病变迅速发展为两肺广泛病变，呈现弥漫分布斑片状渗出阴影，伴有磨玻璃阴影、边界模糊结节状实变影。

SARS-CoV病毒株为PUMC01（Sino-1, GenBank Acc. #; AY350750），分离自一个死于北京协和医院的典型的SARS患者（PUMCH）。SARS-CoV PUMC01病毒通过滴鼻方法感染动物。动物安乐死后，取肺、脾、肝、肠淋巴结和血液样品进行病毒拷贝数和病毒滴度检测。感染后第7、14、21、28天检测SARS-CoV的IgG抗体，感染后第3、6、9和12天检测SARS-CoV的IgG抗体动物安乐死后，取肺、肝、脾、肾和肠淋巴结组织进行病理检查。

[1]秦川,鲍琳琳,邓巍等.血管紧张素转换酶2在SARS-CoV感染中的功能(第2部分)--SARS-CoV在ACE2表达细胞中的复制和ACE2基因敲除对小鼠SARS-CoV感染的保护作用[J].中国比较医学杂志,2005,15(6):330-334. [2]杨秀红,邓巍,童攒等.人ACE2转基因小鼠对SARS-CoV的易感性[J].中国实验动物学报,2007,15(6):453-457. [3]杨秀红,朱华,黄澜等.老龄ICR小鼠对SARS-CoV的易感性[J].中国实验动物学报,2007,15(3):195-197.