艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后，到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690万人，2014年新增感染者200万，2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国，截至2015年5月31日，全国历年累计报告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。

1、 实验用病毒：感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株，病毒原液TCID50为2×107/mL。 2、 感染动物：选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位，后肢抬高，暴露阴道口。用2mL预冷的无菌PBS清洗阴道。再将1mL SIVmac251病毒原液缓慢推入。实验猴保持此姿势30min。 4、 SIVmac251阴道感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后3、7、10、14、17、21、28、42、56天采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血浆病毒载量、CD4+/CD8+比值及血浆抗体测定。 5、 SIVmac251阴道感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SIVmac251阴道感染猴外周血CD4+/CD8+比值测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值。 7、 SIVmac251阴道感染猴血浆抗体测定：免疫荧光法（IFA）检测感染猴血浆中的抗体水平。

冯育芳,王卫,许琰,等.SIVmac251不同途径感染恒河猴急性期实验研究[J].中国比较医学杂志,2007,17(2): 80-83.

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后，到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690万人，2014年新增感染者200万，2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国，截至2015年5月31日，全国历年累计报告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。

1、 实验用病毒：感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定病毒原液TCID50滴度为5×104 TCID50/mL。 2、 感染动物：选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法：将麻醉好的实验猴放在操作台上，动物采取俯卧位以保证直肠粘膜充分暴露，缓慢将10000 TCID50的SIVmac251病毒液2mL注入肛窦处，实验猴保持此姿势30min。 4、 SIVmac251直肠感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后3、7、10、14、21、28、35、42、56、70、84天采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+和CD8+细胞绝对数。 5、 SIVmac251直肠感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SIVmac251直肠感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+和CD8+细胞绝对数。

冯育芳,王卫,许琰,等.SIVmac251不同途径感染恒河猴急性期实验研究[J].中国比较医学杂志,2007,17(2): 80-83.

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后，到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690万人，2014年新增感染者200万，2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国，截至2015年5月31日，全国历年累计报告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。

1、 实验用病毒：感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度为5×103 TCID50/mL。 2、 感染动物：选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法：将1 mL含有50 TCID50 的SIVmac251病毒经后肢静脉接种恒河猴。 4、 SIVmac251静脉感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后7、14、21、28、42、56、84、112、140、168、196、231、259、287天采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+细胞绝对数。 5、 SIVmac251静脉感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SIVmac251静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。

1. 冯育芳,王卫,许琰,等.SIVmac251不同途径感染恒河猴急性期实验研究[J].中国比较医学杂志,2007,17(2): 80-83. 2. Chen S, Lai C, Wu X, Lu Y, Han D, Guo W, Fu L, Andrieu JM, Lu W. Variability of bio-clinical parameters in Chinese-origin Rhesus macaques infected with simian immunodeficiency virus: a nonhuman primate AIDS model. PLoS One. 2011;6(8):e23177. 3. 薛婧，蒋虹，傅春燕，丛喆，陈霆，魏强。SIVmac251感染增强恒河猴巨噬细胞对galectin-3诱导凋亡的敏感性。中国比较医学杂志,2013,23(10):67-71. SIVmac251-infection enhances the sensitivity of rhesus macaque macrophages to galectin-3-induced apoptosis. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE. 2013,(10):67-71. 4. Cong Z, Xue J, Xiong J, Yao N, Wang W, Jiang H, Chen T, Chen Z, Wei Q, Qin C. Correlation of central memory CD4(+) T-Cell decrease in the peripheral blood with disease progression in SIVmac251-infected Chinese rhesus macaques. J Med Primatol. 2015 Aug;44(4):175-82. doi: 10.1111/jmp.12171. Epub 2015 May 6.