| 标识符 | CSTR:16397.09.0G16000445 |
|---|---|
| 资源中文名称 | SIVmac251静脉途径感染恒河猴模型 |
| 资源英文名称 | Rhesus Macaques intravenously infected with SIVmac251 |
| 疾病概述 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后，到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690万人，2014年新增感染者200万，2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国，截至2015年5月31日，全国历年累计报告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
| 实验动物背景信息 | 恒河猴又名孟加拉猴、猕猴或广西猴。学名为（Macaca mulatta），英文名rhesus macaque。分类所属为哺乳纲(Mammalia)，灵长目(Primates)，人猴猿亚目(Anthopoidea)，猴科(Cercopithecidae)，猕猴属(Macaca)。月经周期为28(1-4)天，发情期为11-12个月，怀孕期163天，产仔期3-6个月，胎产仔1-2只，出生重250-380g，哺乳期3-7个月。 猕猴属中，恒河猴使用最广。因分子生物学进展，栗色猕猴用于生理、生化、遗传、血型及免疫等方面的研究更多，病理研究也不少，常用于医疗和药物实验等。 在生物学研究方面可用于生理学、心理学、遗传学的各种研究。 在生理学研究方面可用于脑功能、血液循环、呼吸生理、生殖生理、内分泌和老年学等各项实验。 在医学研究方面可用于感染人类所特有的传染病，特别是其他动物不能复制的传染病 药物学研究方面，预防小儿麻痹的糖丸，恒河猴是唯一的试验对象 ，人类避孕药物的研究，用恒河猴作试验是极为理想的，此外，恒河猴还常用于放射病出血和骨髓移植的实验。 （一）传染病学研究 （二）药理学和毒理学研究 （三）生殖生理研究 （四）口腔医学研究 （五）行为学和高级神经活动研究 （六）营养、代谢研究 （七）老年病研究 （八）器官移植和眼科研究 （九）内分泌病和畸胎学研究 （十）肿瘤学和环保研究 20世纪60年代出版的《猕猴文献录》中，涉及论文的多达五百余篇；在12种猕猴中，使用栗色猕猴的几乎占一半；试加分析，解剖文章占半数，生理学和生态学其次，再次是分类、地理分布、胚胎、进化、遗传和生化病理各有二十余篇，最少的是古生物和畜养、管理的文章。 |
| 模型制作方法 | 1、 实验用病毒：感染毒株为SIVmac251中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度为5×103 TCID50/mL。 2、 感染动物：选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法：将1 mL含有50 TCID50 的SIVmac251病毒经后肢静脉接种恒河猴。 4、 SIVmac251静脉感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后7、14、21、28、42、56、84、112、140、168、196、231、259、287天采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+细胞绝对数。 5、 SIVmac251静脉感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SIVmac251静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。 |
| 模型表型数据 | 1、SIVmac251静脉感染恒河猴外周血病毒载量结果 8只SIVmac251静脉感染恒河猴均在感染后7d检出病毒载量阳性，之后迅速上升，在感染后14d达到高峰，峰值在107至108copies/mL之间，随后迅速下降（图1）。SIVmac251静脉感染后42d到140d感染猴的血浆载量比较稳定，1、2、3、4、9、11六只感染猴血浆病毒载量维持在105至107copies/mL之间；10号猴血浆病毒载量下降至105copies/mL以下；12号猴血浆病毒载量一直维持在较高水平，即107copies/mL以上。 图1 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血病毒载量结果 Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with SIVmac251 2、SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+/CD8+比值结果 8只感染猴CD4+/CD8+的比例在SIVmac251静脉感染后持续下降，均于感染后14d出现倒置。2、4、10、11、12猴在感染后期一直维持在1以下的水平，其中，2、10、11三只猴维持在0.5上下波动。1、3、9三只感染猴在SIVmac251静脉感染后期CD4+/CD8+比值有些许反弹，在1.0上下波动。（图2）。 图2 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值 Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with SIVmac251 3、SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+ T细胞绝对数 8只感染猴CD4+细胞绝对数在SIVmac251静脉感染后迅速下降，随后发生回弹，在感染后56d下降至最低，之后维持在稳定水平（图3）。12号猴的CD4+细胞绝对数在感染后231天下降至50个/µL，出现艾滋病症状，继而死亡。4号猴的CD4+细胞绝对数在感染后259天下降至100个/µL以下；3号猴的CD4+细胞绝对数一直在800-1000个/µL上下浮动。 图3 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数 Fig.3 The CD4+ T cell counts (per l blood) in Chinese-origin rhesus macaques infected intravenously with SIVmac251 |
| 动物模型的评价与验证 | 模拟静脉的感染方式，用于艾滋病研究 。 |
| 保存方式 | |
| 合作方式 | 合作研究 |
| 相关文章 |
1. 冯育芳,王卫,许琰,等.SIVmac251不同途径感染恒河猴急性期实验研究[J].中国比较医学杂志,2007,17(2): 80-83. 2. Chen S, Lai C, Wu X, Lu Y, Han D, Guo W, Fu L, Andrieu JM, Lu W. Variability of bio-clinical parameters in Chinese-origin Rhesus macaques infected with simian immunodeficiency virus: a nonhuman primate AIDS model. PLoS One. 2011;6(8):e23177. 3. 薛婧，蒋虹，傅春燕，丛喆，陈霆，魏强。SIVmac251感染增强恒河猴巨噬细胞对galectin-3诱导凋亡的敏感性。中国比较医学杂志,2013,23(10):67-71. SIVmac251-infection enhances the sensitivity of rhesus macaque macrophages to galectin-3-induced apoptosis. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE. 2013,(10):67-71. 4. Cong Z, Xue J, Xiong J, Yao N, Wang W, Jiang H, Chen T, Chen Z, Wei Q, Qin C. Correlation of central memory CD4(+) T-Cell decrease in the peripheral blood with disease progression in SIVmac251-infected Chinese rhesus macaques. J Med Primatol. 2015 Aug;44(4):175-82. doi: 10.1111/jmp.12171. Epub 2015 May 6. |
| 备注 | 所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 |
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