标识符 | 资源中文名称 | 资源英文名称 | 疾病概述 | 制作方法 | 相关文章 |
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CSTR:16397.09.0I02001121 | a1 Na,K-ATPase转基因大鼠 | 高血压的症状因人而异。早期可能无症状或症状不明显,仅仅会在劳累、精神紧张、情绪波动后发生血压升高,并在休息后恢复正常。随着病程延长,血压明显的持续升高,逐渐会出现各种症状。此时被称为缓进型高血压病。缓进型高血压病常见的临床症状有头痛、头晕、注意力不集中、记忆力减退、肢体麻木、夜尿增多、心悸、胸闷、乏力等。当血压突然升高到一定程度时甚至会出现剧烈头痛、呕吐、心悸、眩晕等症状,严重时会发生神志不清、抽搐。这就属于急进型高血压和高血压危重症,多会在短期内发生严重的心、脑、肾等器官的损害和病变,如中风、心梗、肾衰等。症状与血压升高的水平并无一致的关系。 |
构建wta1 Na,K-ATPase cDNA表达载体(图1)。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到Dahl Salt-sensitive大鼠的受精卵中,用Wistar大鼠作假孕受体,制备转基因大鼠。转基因大鼠出生后,提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Southern blot检测转基因大鼠组织中wta1 Na,K-ATPase的表达(图2)。 图1 R-alpha1NK转基因载体构建 图2 R-alpha1NK转基因大鼠首建鼠southern blot鉴定 泳道1: 首建鼠Tg(wtα1)37;泳道2: 首建鼠Tg(wtα1)48;泳道3: 首建鼠Tg(wtα1)24. |
1.Herrera VL, Xie HX, Lopez LV, Schork NJ, Ruiz-Opazo N., The a1 Na, K-ATPase Gene Is a Susceptibility Hypertension Gene in the Dahl Salt-sensitive HSD Rat. J. Clin. Inv. 1998 Sep 15; 102(6):1102-11. |
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CSTR:16397.09.0C01000900 | 人食管癌细胞EC9706红色荧光标记肿瘤模型 | EC9706-DsRed | 食管癌是常见的消化道肿瘤,全世界每年约有30万人死于食管癌。其发病率和死亡率各国差异很大。我国是世界上食管癌高发地区之一,每年平均病死约15万人。男多于女,发病年龄多在40岁以上。食管癌典型的症状为进行性咽下困难,先是难咽干的食物,继而是半流质食物,最后水和唾液也不能咽下。 |
模型制作采用BALB/CA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。 4.1细胞培养:EC9706细胞为本实验室冻存 4.2构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin- promoter-DsRed 图1红色荧光表达载体的构建 4.3细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent转染EC9706细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达RFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养(图2)。 图2红色荧光标记的EC9706细胞系(200×) 稳定高表达RFP的细胞,在荧光显微镜下均呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆RFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达RFP(图2)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。 4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行裸鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
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CSTR:16397.09.0C01000901 | 人食管癌细胞EC9706绿色荧光标记肿瘤模型 | EC9706-eGFP | 食管癌是常见的消化道肿瘤,全世界每年约有30万人死于食管癌。其发病率和死亡率各国差异很大。我国是世界上食管癌高发地区之一,每年平均病死约15万人。男多于女,发病年龄多在40岁以上。食管癌典型的症状为进行性咽下困难,先是难咽干的食物,继而是半流质食物,最后水和唾液也不能咽下。 |
模型制作采用BALB/CA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。 4.1细胞培养:EC9706细胞为本实验室冻存 4.2构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin- promoter-eGFP 图1绿色荧光表达载体的构建 4.3细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent转染EC9706细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养(图2)。 图2绿色荧光标记的EC9706细胞系(200×) 稳定高表达GFP的细胞,在荧光显微镜下均呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达GFP(图2)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。 4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行裸鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
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CSTR:16397.09.0C01000919 | 人大细胞肺癌H460绿色荧光标记肿瘤模型 | H460-eGFP | 大细胞肺癌起源于支气管粘膜上皮,局限于基底膜内者称为原位癌。癌肿可向支气管腔内或和临近的肺组织生长,并可通过淋巴、血行或经支气管转移扩散。其生长速度和转移扩散的情况与具体的组织学类型、分化程度等生物学特性有一定关系。大细胞肺癌常发生于肺上叶,多为周围型,体积较大,边界清楚,分叶,少见空洞。根据其病理类型可分为4类:(1)大细胞神经内分泌癌 这是一类显示神经内分泌分化的大细胞癌。细胞较大,呈多角形,胞质嗜酸,核多形,核仁较明显,核分裂像多见,常见大面积坏死。免疫组化染色,神经内分泌标记阳性,电镜下可见神经内分泌颗粒;(2)基底细胞样癌 细胞较大,立方形或梭形,分叶状或实性巢状排列,周边部癌细胞呈栅栏状排列;(3)淋巴上皮瘤样癌 罕见。组织形态与鼻咽部淋巴上皮瘤样癌相同。癌细胞打,泡状核,核仁明显,细胞成片或呈巢状,癌巢内及间质中有淋巴细胞侵润;(4)透明细胞癌罕见。瘤细胞打,多角形,胞质透明或泡沫状,无粘液,伴或不伴糖原。伴横纹肌样表型的大细胞癌罕见。细胞核大,多形性,胞质丰富,有嗜酸性小球,免疫组织化学既表达上皮性抗原,也显示横纹肌表型。 |
模型制作采用BALB/CA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。 4.1细胞培养:H460细胞为本实验室冻存 4.2构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin- promoter-eGFP 图1绿色荧光表达载体的构建 4.3细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent转染H460细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养(图2)。 图2绿色荧光标记的H460-eGFP细胞系(200×) 稳定高表达GFP的细胞,在荧光显微镜下均呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达GFP(图2)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。 4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行裸鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
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CSTR:16397.09.0C01000918 | 人大细胞肺癌H460红色荧光标记肿瘤模型 | H460-DsRed | 大细胞肺癌起源于支气管粘膜上皮,局限于基底膜内者称为原位癌。癌肿可向支气管腔内或和临近的肺组织生长,并可通过淋巴、血行或经支气管转移扩散。其生长速度和转移扩散的情况与具体的组织学类型、分化程度等生物学特性有一定关系。大细胞肺癌常发生于肺上叶,多为周围型,体积较大,边界清楚,分叶,少见空洞。根据其病理类型可分为4类:(1)大细胞神经内分泌癌 这是一类显示神经内分泌分化的大细胞癌。细胞较大,呈多角形,胞质嗜酸,核多形,核仁较明显,核分裂像多见,常见大面积坏死。免疫组化染色,神经内分泌标记阳性,电镜下可见神经内分泌颗粒;(2)基底细胞样癌 细胞较大,立方形或梭形,分叶状或实性巢状排列,周边部癌细胞呈栅栏状排列;(3)淋巴上皮瘤样癌 罕见。组织形态与鼻咽部淋巴上皮瘤样癌相同。癌细胞打,泡状核,核仁明显,细胞成片或呈巢状,癌巢内及间质中有淋巴细胞侵润;(4)透明细胞癌罕见。瘤细胞打,多角形,胞质透明或泡沫状,无粘液,伴或不伴糖原。伴横纹肌样表型的大细胞癌罕见。细胞核大,多形性,胞质丰富,有嗜酸性小球,免疫组织化学既表达上皮性抗原,也显示横纹肌表型。 |
模型制作采用BALB/CA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。 4.1细胞培养:H460细胞为本实验室冻存 4.2构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin- promoter-DsRed 图1红色荧光表达载体的构建 4.3细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent转染H460细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达RFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养(图2)。 图2红色荧光标记的H460细胞系(200×) 稳定高表达RFP的细胞,在荧光显微镜下均呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆RFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达RFP(图2)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。 4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行裸鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
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CSTR:16397.09.0G16000430 | SIVmac251-THC--BG颅内感染恒河猴模型 | Rhesus Macaques Intracranially infected with SIVmac239 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、 实验用病毒:感染毒株为SIVmac251-THC--BG,使用中国恒河猴PBMCs扩增制备,CEMx174细胞滴定TCID50为1×104/mL。 2、 感染动物:选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法:将SIVmac251-THC--BG病毒原液稀释至1 mL,经颅内接种恒河猴。 4、SIVmac251-THC--BG颅内感染猴样品采集和指标测定:在感染前和感染后10、17、24、28、42、56、84天采集EDTA抗凝血4mL,分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+细胞绝对数。 5、 SIVmac251-THC--BG颅内感染猴血浆病毒载量的测定:提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、SIVmac251-THC--BG颅内感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定:CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞,流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值,并根据血常规结果,计算出CD4+T细胞绝对数。 |
无 |
CSTR:16397.09.0G16000431 | SHIVchn19p4静脉途径感染恒河猴模型 | Rhesus Macaques intravenously infected with SHIVchn19p4 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、 实验用病毒:感染毒株为SHIVchn19p4中国恒河猴细胞适应株,TZM-bl细胞检测病毒感染效价为1.5×104 TCID50/mL。 2、 感染动物:选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法:猴G0601V和G0602V经后肢静脉感染1ml (1×104 TCID50/ml)病毒。 4、 SHIVchn19p4静脉感染猴样品采集和指标测定:在感染前和感染后4、7、9、11、14、18、21、28、35、42、49、56、70、84及120d采集猴静脉血3ml(EDTA抗凝),用于外周血病毒载量、CD4+细胞绝对数及总结合抗体滴度测定。 5、 SHIVchn19p4静脉感染猴血浆病毒载量的测定:提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SHIVchn19p4静脉感染猴外周血CD4+绝对数测定:CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞,流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值,并根据血常规结果,计算出CD4+T细胞绝对数。 7、 SHIVchn19p4静脉感染恒河猴外周血总结合抗体滴度检测:恒河猴血浆样品从1:2开始2倍连续稀释后,用“人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)”检测交叉性体液免疫反应,高于Cut-off值的最大血浆稀释度定义为SHIV特异性总结合抗体滴度 |
1. 丛喆,陶真,刘浩,姚南,金光,陈霆,魏强. SHIVchn19p7中国恒河猴细胞适应株的制备和生物特性研究[J]. 医学动物防制. 2010. 26(8): 690-691. 2. 刘浩,刘强,丛喆,王卫,乔红伟,陈志伟,魏强。C亚型SHIVCHN19P4强毒株在中国恒河猴体内的传代研究。中国比较医学杂志,2011,21(4):6-11。Serial Passages of Virus Clade C SHIVCHN19P4 inChinese Rhesus Macaque. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE, 2011,21(4):6-11. |
CSTR:16397.09.0G16000432 | SHIV KU-1静脉途径感染恒河猴模型 | Rhesus Macaques intravenously infected with SHIV KU-1 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、 实验用病毒:感染毒株为SHIV KU-1中国恒河猴细胞适应株,中国恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度为103.75 TCID50/mL。 2、 感染动物:选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法:用0.4ml SHIV KU-1病毒原液经后肢静脉接种恒河猴。 4、 SHIV KU-1静脉感染猴样品采集和指标测定:感染前和感染后按指定时间点采集EDTA抗凝血4mL,分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+细胞绝对数。 5、 SHIV KU-1静脉感染猴血浆病毒载量的测定:提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SHIV KU-1静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定:CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞,流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值,并根据血常规结果,计算出CD4+T细胞绝对数 |
1. 丛喆,蒋虹,苏爱华,王卫,陈霆,薛婧,魏强。CXCR4嗜性SHIVKU-1病毒静脉感染中国恒河猴初步研究。中国比较医学杂志,2013,23(6):53-57.Characterization of a Chinese-origin rhesus macaque model of X4-tropic pathogenic SHIVKU-1 infection by intravenous injection. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE. 2013,23(6):53-57. 2. 丛喆,徐珮,董志会,陈霆,蒋虹,魏强.SHIVKU-1感染猴感染晚期血浆病毒分离结果分析.医学动物防制,2014,30(12):1361-1367.Analysis of the Virus Isolation Result from Late-stage Plasma of Rhesus Macaques Infected with SHIVKU-1. J Med Pest Control,2014,30(12):1361-1367. |
CSTR:16397.09.0G16000447 | 基于HAART治疗的艾滋病潜伏感染恒河猴模型 | Latent Infected Animal Model for AIDS with HAART | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、实验材料:SIVmac239病毒;选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 2、 静脉途径SIV恒河猴感染模型制作方法: 先用宠物用电推剪推去猴上肢采血部位的猴毛,左手抓住一侧后肢跗关节部位,使后肢皮下静脉怒张。用75%酒精酒精棉球消毒。右手拿吸取病毒液的注射器,针头沿静脉平行方向向向心端刺入血管,见回血后,左手放松,不再紧压,右手缓慢将病毒液推入。完毕后用干棉球压迫止血,将注射器拔出,弃在利器专用桶内。 3、 给药方法:将建立稳定的SIVmac239慢性感染的恒河猴,经皮下注射TFV/FTC/DTG,每天给药一次,连续给药6个月。 4、 样本收集和检测:定期收集外周血样本,提取病毒RNA和病毒DNA,测定血浆病毒载量、总病毒DNA、ALU-PCR和Q-VOA。 |
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CSTR:16397.09.0G16000448 | 基于HIV融合抑制剂的艾滋病潜伏感染恒河猴模型 | Latent Infected Animal Model for AIDS with HIV Fusion Inhibitor | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、实验材料:SHIVSF162P3病毒;选用体重4-6 kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 2、静脉途径SHIV恒河猴感染模型制作方法: 先用宠物用电推剪推去猴上肢采血部位的猴毛,左手抓住一侧后肢跗关节部位,使后肢皮下静脉怒张。用75%酒精酒精棉球消毒。右手拿吸取病毒液的注射器,针头沿静脉平行方向向向心端刺入血管,见回血后,左手放松,不再紧压,右手缓慢将病毒液推入。完毕后用干棉球压迫止血,将注射器拔出,弃在利器专用桶内。 3、给药方法:将建立稳定的SHIVSF162P3慢性感染的恒河猴,经肌肉注射3mg/kg的HIV融合抑制剂,每周给药一次,连续给药6个月。 4、样本收集和检测:定期收集外周血样本,提取病毒RNA和病毒DNA,测定血浆病毒载量和总病毒DNA |
[1] Chong H, Xue J, Xiong S, Cong Z, Ding X, Zhu Y, Liu Z, Chen T, Feng Y, He L, Guo Y, Wei Q, Zhou Y, Qin C*, He Y*. A Lipopeptide HIV-1/2 Fusion Inhibitor with Highly Potent In Vitro, Ex Vivo, and In Vivo Antiviral Activity. J Virol. 2017 May 12;91(11):e00288-17. [2] Chong H, Xue J, Zhu Y, Cong Z, Chen T, Guo Y, Wei Q, Zhou Y, Qin C*, He Y*. Design of Novel HIV-1/2 Fusion Inhibitors with High Therapeutic Efficacy in Rhesus Monkey Models. J Virol. 2018 Jul 31;92(16):e00775-18. [3]Chong H, Xue J, Zhu Y, Cong Z, Chen T, Wei Q, Qin C*, He Y*. Monotherapy with a low-dose lipopeptide HIV fusion inhibitor maintains long-term viral suppression in rhesus macaques. PLoS Pathog. 2019 Feb 4;15(2):e1007552. |
艾滋病人源化小鼠模型 | HIV infected humanized immune system mouse models | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1. NRG小鼠饲养:NRG小鼠需要饲养在隔离器或者单独的房间IVC中。 2.纯化造血干细胞:用CD34纯化干细胞试剂盒,纯化脐带血中造血干细胞,纯化的细胞当天移植。 3. 将 4-6 周NRG小鼠提前2小时辐照,剂量是 1.5Gy。 4.将纯化的 CD34+造血干细胞尾静脉注入照射后的小鼠体内,每只小鼠注射1×105 细胞。 5.12周后,采血检测人细胞的比例:抗小鼠 PE-CD45;抗人 APC CY7-CD45;抗人 APC-CD3。 6. 麻醉小鼠,用HIV病毒,静脉感染。 7.感染4周后,检测HIV病毒的RNA |
1. Cheng L, Yu H, Li G, Li F, Ma J, Li J, Chi L, Zhang L, Su L. (2017). "Type I interferons suppress viral replication but contribute to T cell depletion and dysfunction during chronic HIV-1 infection." JCI Insight 2(12). 2. Cheng L, Ma J, Li J, Li D, Li G, Li F, Zhang Q, Yu H, Yasui F, Ye C, Tsao LC, Hu Z, Su L, Zhang L. (2017). "Blocking type I interferon signaling enhances T cell recovery and reduces HIV-1 reservoirs." J Clin Invest 127(1): 269-279. |
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CSTR:16397.09.0G16000433 | SHIV-KB9静脉途径感染恒河猴模型 | Rhesus Macaques intravenously infected with SHIV-KB9 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后,到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690万人,2014年新增感染者200万,2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国,截至2015年5月31日,全国历年累计报告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题,艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
1、 实验用病毒:感染毒株为SHIV-KB9中国恒河猴细胞适应株,RT-PCR测定病毒拷贝数为4.8×108copies/mL。 2、 感染动物:选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常,必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相关的4种基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、 感染方法:4只恒河猴编号分别为A0423、A0424、A0425和A0426。病毒原液依次用无血清1640培养液做10倍系列稀释。经后肢静脉感染,每只猴注射1mL稀释好的病毒液。A0423-A0426分别注射10-1-10-4病毒液1mL。持续测定8个月。 4、 SHIV-KB9静脉感染猴样品采集和指标测定:在感染前和感染后3、7、10、14、17、21、28、35、42、49、56、70及84天采集猴静脉血6mL,3mL EDTA抗凝,用于病毒载量和CD4+/CD8+值测定。 5、 SHIV-KB9静脉感染猴血浆病毒载量的测定:提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA,使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、 SHIV-KB9静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定:CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞,流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值,并根据血常规结果,计算出CD4+T细胞绝对数。 |
1. 王卫, 刘强,许琰,冯育芳,丛喆,佟巍,蒋虹,杨贵波,魏强,秦川。SHIV-KB9感染中国恒河猴动物模型的建立。中国比较医学杂志,2011,21(2):1-6。Establishment of a Chinese-Origin Rhesus Macaque Model of SHIV-KB9 Virus Infection. CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE, 2011,21(2):1-6. 2. 丛喆,陶真,王卫,陈霆,金光,姚南,苏爱华,魏强。SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株的制备。中国畜牧兽医,2012,39(3):23-27. The Propagation and Evaluation of SHIV-KB9 adapative virus stock in Chinese original Rhesus Macaques. CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE. 2012,39(3):23-27. 3. Yue Li,Qiang Liu,Zhenwu Luo,Yan meng Feng,Zhe Li,Qiang Wei and Y iming Shao. Partial Protection of SHIV-Infected Chinese Rhesus Macaques Against Super-Infection with Heterologous SHIV Isolate. Current HIV Research,2012,10,627-635. 4. Wang W, Cong Z, Jiang H, Chen T, Jin G, Xiong J, Qin C, Wei Q. Comparison of viral burden and disease progression in Chinese-origin rhesus macaques infected with common experimentally applied chimeric virus: SHIV-1157ipd3N4, SHIV-162P3, or SHIV-KB9. J Med Primatol.2014 Aug;43(4):247-57. |