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标识符 CSTR:16397.09.0C02000028
资源中文名称 A/Vietnam/1194/2004(H5N1)滴鼻途径感染Lewis大鼠模型
资源英文名称 A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) virus intranasally infected Lewis rat model
疾病概述 H5N1禽流感病毒感染的潜伏期一般为2~4天,平均3天。发病前1天就开始排毒,排毒时间儿童比成人长,免疫抑制者排毒可长达一个多月。临床表现为急性起病,早期表现类似一般流感。主要为发热,体温大多持续在38℃以上,热程1~7天,一般为3~4天,可伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和浑身不适。少数患者可有恶心、腹泻、稀水样便等症状。重症患者病情发展迅速,可出现肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少,肾功能衰竭,败血症、休克及Reye综合征等多种并发症。
实验动物背景信息

Lewis大鼠:来源于Wistar原种,最先由Lewis繁殖,1954年Aptekman和Bogden繁殖到20代,到1958年Silvers繁殖到31代。①毛色:白化(a,h,c)。②免疫:接种豚鼠髓磷脂碱蛋白后,对实验过敏性脑脊髓炎敏感。极易感染诱发自家免疫性心肌炎。对诱发自家免疫性复合性肾小球肾炎敏感(这与主要组织相容性复合物有关)。易感染实验过敏性脑炎和药物诱发的关节炎。③生理学:血清甲状腺素高,血清胰岛素和血清生长激素高。动物的肥胖取决于饮食的高脂肪物的含量。雌鼠乙基吗啡的肝脏代谢率高。④肿瘤:常见淋巴瘤,肾肉瘤,纤维肉瘤 MC-39,ML-1,ML-7,Lewis10瘤和Lewis3肉瘤。⑤饲养繁殖:易驯养,繁殖率高。2年龄大鼠的存活率为26%。

模型制作方法

病毒株为A/Vietnam/1194/2004禽流感病毒。感染组大鼠在感染后2、4、6、8天各解剖一只进行尸检,测定肺部H5N1病毒RNA和滴度,并同时进行病理学检测。

模型表型数据
1.大鼠体重变化

感染组大鼠体重均呈持续增长(表1、图1)。

表1 大鼠体重变化情况

分组天数

攻毒组

实验前

169.6±18.5

攻毒2天

172.2±23.4

攻毒4天

190.3±21.0

攻毒6天

194.2±34.4

攻毒8天

253.3

攻毒22天

-

 

图1 大鼠体重情况

2. 大鼠白细胞总数变化情况

感染组大鼠的白细胞总数均出现一过性增高(图2)。

 

图2 大鼠白细胞总数变化情况

3.大鼠尸检情况

在不同时间点对感染组大鼠进行解剖,检测肺部病毒复制情况。感染组大鼠肺组织在感染后第4、6天检测到病毒RNA,感染后第2天能够分离出H5N1病毒(表2)。

表2 大鼠肺部H5N1病毒分离情况

动物号

尸检天数

RT-PCR

Virus Isolation

血清抗体滴度

攻毒1#

2

-

+

-

攻毒2#

4

+

-

-

攻毒3#

6

+

-

-

攻毒4#

8

-

-

-

 

4.大鼠肺部病理

大鼠感染H5N1后肺泡间隔增宽,肺泡融合,有炎性渗出(图3)。

图3 感染组大鼠肺部病理(H&E)

在感染H5N1病毒的大鼠肺部通过免疫组织化学方法检测到H5N1病毒,且检出率达75%(表3)。

图4 感染组大鼠肺部病理(IHC)

 

表3 感染大鼠肺部免疫组织化学结果

动物号

免疫组化结果

攻毒1#

+

攻毒2#

+

攻毒3#

+

攻毒4#

-

动物模型的评价与验证
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