Hela细胞是典型的永生化细胞系，是人上皮细胞，源自一名美国妇女的子宫颈癌细胞，此细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒 (Human Papillom avirus 18或HPV 18 )转型成癌细胞的，而且和正常子宫颈癌细胞有许多不同，此细胞显角蛋白免疫沉淀染色阳性，包含HPV-18序列，有正常水平的pRB表达和p53的低水平表达。该细胞是一种体外培养环境中仍具有接触抑制行为的贴壁细胞，然而接触抑制行为的丧失是细胞癌变的表现之一，即细胞能够在实验动物中成瘤，并且可成多层生长。因此，Hela细胞在实验动物中不具有致瘤性，但是病毒致癌基因的转入能够使其具备实验动物成瘤性。Hela细胞具有82条染色体，其中12号染色体4个拷贝数，6、8及17号染色体3个拷贝数。

无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠）目前已成为医学生物学研究领域中不可缺少的实验动物模型。经过世界各国实验动物遗传育种学家的努力，目前已将nu基因导入不同近交系动物，成为系列动物模型，仅小鼠模型一种，已建立了二十余种近交系裸鼠。由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情况下，不排斥来自异种动物的组织移植。因此可作移植人类恶性肿瘤的接受体。根据T.Fogh等1979～1980年的报导，已有150株人的瘤细胞和人体原发癌移植于裸鼠获得成功，目前已成功地将人结肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、肾癌、宫颈癌、软组织肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、获得了一定百分比（35.7%）的良好生长，并可传代。若用已建株的人体肿瘤组织培养细胞作移植材料，接种后的成活率更高（41%）。

本实验中所用鼠种BALB/c-nu/nu，系1973年从丹麦引入日本中央实验动物所研究。继续培育三年后，交由日本CLEA株式会社进行生产。1980年由CLEA引入。雄鼠是无胸腺裸鼠（BALB/c-nu/nu），雌鼠是有胸腺的杂合小鼠（BALB/c-nu/+）。采用BALB/c-nu/+♀与BALB/c-nu/nu♂随机交配法进行繁殖，已取得较好成果，裸鼠的生产性能良好：受胎率达81.5%，平均产仔率8.1只/窝，平均产裸仔率3.99只/窝，每窝平均成活3.62只仔鼠，9周龄仔鼠成活率100%，其主要项目数据与日本中央实验动物研究所（CLEA）和英国实验动物中心（LAC）发表的材料基本一致。

模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠龄5周，体重15-18g，在无特定病原体(specific—pathogen free，SPF)的饲养间饲养。

4.1细胞培养：Hela细胞为本实验室冻存

4.2构建带有筛选标记的载体：chicken-β-actin-promotor-DsRed

4.3细胞转染和筛选：采用Lipofectamine 2000 Reagent 转染Hela细胞。转染后，用含G418的培养液筛选细胞，获得稳定表达RFP的细胞株，选择其中高表达的克隆株扩大培养。

图1 表达RFP的Hela细胞株（200×）

稳定高表达RFP的细胞，在荧光显微镜下均呈强荧光，并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆RFP细胞在无G418筛选压力下，传代数次后仍能稳定高水平表达RFP(图1)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。

4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像：收集处于生长对数期的高表达细胞株，进行裸鼠皮下接种，采用活体荧光影像系统摄像动态观察。

5.1影像表现
 

图2 皮下接种Hela-RFP肿瘤生长影像分析

应用小动物活体荧光成像系统可监测到红色荧光蛋白在裸小鼠皮下的稳定表达，从第1周至第3周，随着肿瘤移植时间的增加，表达红色荧光蛋白的面积逐渐增大。