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标识符 CSTR:16397.09.0C01000192
资源中文名称 条件性Hbxip-Floxp基因除大鼠模型
资源英文名称 Hbxip-Floxp conditional knockout rat model
疾病概述 Hbxip基因(Lamtor5)首次在人肝癌细胞系HepG2中发现,编码一种与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx) C端特异性结合的蛋白。该蛋白的功能是负向调节HBx的活性,从而改变病毒的复制生命周期。HBXIP蛋白与多种致癌信号相关:HBXIP通过NF-kB信号通路促进细胞增殖;通过氨基酸激活mTORC1信号通路,促进癌细胞增殖和迁移;通过pAKT/MDM2途径促进人乳腺癌生长。多项研究表明,HBXIP与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,包括乳腺癌、肝癌、肺癌等,可能作为癌蛋白参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡和迁移。此外,HBXIP在调节糖代谢中也具有重要作用,参与了对胰岛素基因的转录调控。
实验动物背景信息

F344大鼠

模型制作方法

基因敲除构建设计

模型表型数据

条件性Hbxip-Floxp采用PCR方式进行基因敲除的鉴定。

引物设计

引物名称

引物库

引物序列(5-3 

PCR 产物大小

跑胶检测loxp 插入情况

F1

R-CKO-G3-LOXP1-F

TGCATTGTTTGTGGCTTTGTG

KI 275 WT 241

R1

R-CKO-G3-LOXP1-R

ATTCTTCATTCTAATTTTGGGAGC

跑胶检测loxp 插入情况

F2

R-CKO-G3-LOXP2-F

CTGCTACTAGCCTCCCTTTGG

KI 230 WT 196

R2

R-CKO-G3-LOXP2-R

TCTAAAGCCCTCTTCCAGACC

跑胶检测送大带测序

F

R-CKO-G3-F

GGAGGTCTTACAAGAAGACGCG

KI1 745 WT 1677

R

R-CKO-G3-R

CCAAGAGGCTCCCTCTGTTC

测序结果:黑色箭头代表野生型序列,红色箭头代表插入的序列,L 端和R 端测序的峰形分析,都可确认在1#大鼠floxp 序列(ATAACTTCGTATAGCATACATTATACGAAGTTAT)精确插入指定位置。具体见图3。根据测序结果分析 Lamtor5-loxp条件性敲除大鼠构建成功。

 

L 端flxop 插入分析(测序引物:R1)

R 端flxop 插入分析(测序引物:F2)

3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果

动物模型的评价与验证 多项研究表明,HBXIP与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,包括乳腺癌、肝癌、肺癌等,可能作为癌蛋白参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡和迁移。此外,HBXIP在调节糖代谢中也具有重要作用,参与了对胰岛素基因的转录调控。
保存方式 活体
合作方式 不限定
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