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标识符 CSTR:16397.09.0C01000188
资源中文名称 全身性Muc2基因敲除小鼠模型
资源英文名称 Muc2 knockout mouse model
疾病概述 慢性结直肠炎的主要症状有:①排便异常:多数患者有便秘、腹泻或便秘腹泻交替出现。②血便、粘液便或脓血粘液便:多数患者有粘液或粘液血便,直肠炎症明显时可有血便或脓血便。③腹痛:可有轻至中度下腹隐痛,有腹痛—便意—便后缓解的规律。④肛内感觉异常:直肠炎患者常有大便不尽,里急后重感,亦可伴有肛内灼热、疼痛等感觉异常。结肠直肠癌(carcinoma of colon and rectum)是胃肠道中常见的恶性肿瘤,早期症状不明显,随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状,晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。Muc2基因编码的蛋白属于粘蛋白家族的一员,粘蛋白是许多上皮组织产生的高分子量糖蛋白。大部分肠道黏液蛋白由Muc2基因编码并由杯状细胞分泌,这种不可溶解的粘液屏障可以保护肠腔。Muc2基因的遗传缺陷可导致粘液减少90%,肠上皮细胞暴露于肠腔内容物增加,同时小鼠肠道内细胞增殖、迁移和凋亡发生改变,最终导致自发性结肠炎和结直肠癌,进一步研究表明:Muc2缺陷小鼠自发发展为慢性结肠炎在早期年龄(<3个月),其组织病理学是类似于溃疡性结肠炎的病人;3个月后,Muc2−/−小鼠更容易发生结肠或直肠肿瘤。因此,Muc2基因敲除小鼠是研究慢性结肠炎和结肠癌的理想模型。同时,由于肠道生态失调与结肠炎相关的结直肠癌发生有关,Muc2基因敲除小鼠也是研究肠道微生物对肠道保护作用的优选模型。
实验动物背景信息

C57BL/6J小鼠

模型制作方法

基因敲除构建设计

模型表型数据

全身性Muc2 基因敲除小鼠采用PCR方式进行鉴定。

(1)引物信息:见表1

1. 鉴定引物序列

引物设计

引物名称

引物序列

PCR 产物大小

跑胶检测野生情况

F

GGTAAGGGAACAGGCAGAATC

WT372bp

WT-R

GGGATGGGTCCTTCAGTCTTC

跑胶检测敲除带情况

F

GGTAAGGGAACAGGCAGAATC

KO : 约300bp WT41kbp

R

GGAAGGACATGTGTCTGTTTCGT

 

测序结果:将F/R 引物扩增的PCR 产物测序确认该小鼠为Muc2基因片段删除的杂合子(测序引物F),具体见图3。说明全身性Muc2基因敲除小鼠构建成功。

3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果

动物模型的评价与验证 Muc2基因编码了大部分肠道黏液蛋白,用以形成保护肠腔的粘液屏障。Muc2基因的遗传缺陷可导致粘液减少90%,肠上皮细胞暴露于肠腔内容物增加,同时小鼠肠道内细胞增殖、迁移和凋亡发生改变,最终导致自发性结肠炎和结直肠癌。Muc2缺陷小鼠可自发发展为慢性结肠炎,更容易发生结肠或直肠肿瘤。Muc2基因敲除小鼠是研究慢性结肠炎和结肠癌的理想模型,也是研究肠道微生物对肠道保护作用的优选模型。
保存方式 活体
合作方式 不限定
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