| 标识符 | CSTR:16397.09.0C01000191 | |||||||||
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| 资源中文名称 | 全身性Lep基因敲除小鼠模型 | |||||||||
| 资源英文名称 | Lep knockout mouse model | |||||||||
| 疾病概述 | 肥胖是指身体超重，脂肪异常堆积的状态。肥胖与多种疾病有关，如糖尿病、某些癌症、高血压和心血管疾病。肥胖一直被认为是由个人习惯造成的，主要是热量摄入过多和缺乏锻炼。此外，遗传成分，如遗传缺陷和遗传变异，包括瘦素基因突变，也可能对超重和肥胖的发展有强大的作用等。瘦蛋白是一种由白色脂肪细胞、骨骼肌、胎盘和垂体等组织产生的激素，主要由脂肪组织分泌；影响下丘脑，调节食欲和能量平衡，从而导致体重增加。同时，瘦蛋白对于维持垂体GH细胞及其功能也很重要。当促生长激素细胞的瘦蛋白受体发生缺失，则导致GH细胞数量减少、循环生长激素减少，最终引起成体性肥胖。Lep基因缺失导致小鼠自发性肥胖，基因敲除的纯合子小鼠具有肥胖、嗜食、活性低、代谢效率高、产热受损、不孕和寿命短等表型，体重达到正常小鼠的三倍，影响糖尿病的严重程度和病程。与高脂饮食诱导的肥胖(DIO)小鼠相比，Lep基因敲除小鼠表现出不受调节的进食(贪食)，这导致肥胖、糖尿病和比DIO小鼠症状更为严重的疾病。 | |||||||||
| 实验动物背景信息 | C57BL/6J小鼠 |
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| 模型制作方法 | 1.根据Lep 的基因组序列结构，设计CRISPR 靶点：
根据目前基因组数据，Lep 基因存在2 个转录产物，见下图： http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Gene/Summary?db=core;g=ENSMUSG00000059201;r=6:29060220-29073877
Lep 保守区域分析：
根据Lep 基因组结构和蛋白功能保守区，Lep 有2 个转录产物。选取Lep-201进行设计，Exon2-3(aa1-167)，为编码蛋白的转录产物的外显子,而且也是Lep 基因所有转录本Lep-202 的全部的外显子序列，删除这Exon2-3 后，翻译该蛋白的mRNA 将不会被转录出来，而且该基因被完全敲除。因此决定在Exon2-3 的两边设计靶点，实现Exon2-3 敲除。 下面将根据Exon8 设计条件性敲除方案。 转录产物Lep-201 的基因组结构：
2.F0 代构建及繁殖：
基因敲除构建设计。
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| 模型表型数据 | 全身性lep基因敲除小鼠采用PCR方式进行鉴定。 （1）引物信息：见表4 表4. 鉴定引物序列
（2）PCR结果：见图1-5#、7-10#小鼠PCR结果符合要求，需进一步测序鉴定。
图2. F/R 检测Lep基因删除情况  图3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果 |
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| 动物模型的评价与验证 | Lep基因缺失导致小鼠自发性肥胖，基因敲除的纯合子小鼠具有肥胖、嗜食、活性低、代谢效率高、产热受损、不孕和寿命短等表型，体重达到正常小鼠的三倍，影响糖尿病的严重程度和病程。与高脂饮食诱导的肥胖(DIO)小鼠相比，Lep基因敲除小鼠表现出不受调节的进食(贪食)，这导致肥胖、糖尿病和比DIO小鼠症状更为严重的疾病。 | |||||||||
| 保存方式 | 活体 | |||||||||
| 合作方式 | 不限定 | |||||||||
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| 备注 |
京公网安备 11010502043083号