标识符 | CSTR:16397.09.0G01001023 |
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资源中文名称 | 免疫系统人源化的小鼠模型 |
资源英文名称 | Humanized immune system mouse models |
疾病概述 | 免疫系统人源化的小鼠模型可以用于所有针对人免疫系统所产生的疾病。该模型在细胞发育、感染性疾病、自身免疫病以及肿瘤治疗等领域有很多的应用,为研究临床疾病提供了良好的研究平台。 |
实验动物背景信息 | 重度免疫缺陷小鼠NRG(NOD.Cg-Rag1-/-l2rg-/-)。 |
模型制作方法 | 1.实验动物
NRG小鼠:NOD-scid小鼠敲除Rag1和Il2rg,购于美国实验室。 饲养场所:中国医学科学院医学实验动物研究所SPF动物房的隔离器。 2.试剂
Histopaque(1.077g/ml)淋巴细胞分离液 CD34+HSC分离试剂盒 抗小鼠 PE-CD45 抗人 APC-CD3 抗人 APC CY7-CD45 无血清干细胞培养基 3.仪器和耗材
生物安全柜 低温高速离心机 倒置显微镜 0.5 mL胰岛素注射器 4.细胞
脐带血来自合作医院或者脐血库(具有伦理证明)。 根据用CD34纯化干细胞试剂盒,纯化脐带血中造血干细胞,纯化的细胞当天移植。 5.移植
1)选取新生鼠或者4周雌鼠,用X-RAY辐照仪照射,剂量是 1.5Gy。
2)将纯化的 CD34+造血干细胞尾静脉注入照射后的小鼠体内,每只小鼠注射1×10e5 细胞。
3)12周后,采血检测人细胞的比例:抗小鼠 PE-CD45;抗人 APC CY7-CD45;抗人 APC-CD3。
6.动物IACUC:YHS18001-于海生-人源化小鼠模型的构建
7.制备流程图:
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模型表型数据 | 1.造血干细胞纯化
CD34+细胞的纯度,流式染色在90%以上,如图所示;
2.表型分析
移植12周后,分别取外周血、骨髓、肝脏和脾脏,通过染色人的CD45、人CD3和小鼠的CD45,鉴定人细胞重建比例,结果见下图。
3.病理表型
取脾脏、肝脏、淋巴结和肠,通过组化染色人CD45,见下图: |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
合作方式 | |
相关文章 | 1. Cheng L, Yu H, Li G, Li F, Ma J, Li J, Chi L, Zhang L, Su L. (2017). "Type I interferons suppress viral replication but contribute to T cell depletion and dysfunction during chronic HIV-1 infection." JCI Insight 2(12). |
备注 |