艾滋病病毒感染的人源化小鼠模型-

数据导出

分享到：

标识符	CSTR:16397.09.0G01000446
资源中文名称	艾滋病病毒感染的人源化小鼠模型
资源英文名称	HIV infected humanized immune system mouse models
疾病概述	艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的CD4+T淋巴细胞作为主要攻击目标，大量破坏该细胞，使人体丧失免疫功能。因此，人体易于感染各种疾病，并可发生恶性肿瘤，病死率较高。HIV在人体内的潜伏期平均为8-9年，患艾滋病以前，可以没有任何症状地生活和工作多年。在2017年，在全球的HIV携带者在全世界超过3,700万，新发感染者约180万；在我国，全国报告存活感染者75万，死亡23万例，每年新发感染者8万例左右。艾滋病已经成为严重危害人类健康的传染病之一。对于艾滋病，目前没有有效的HIV疫苗，也没有任何药物可以治愈艾滋病。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。
实验动物背景信息	重度免疫缺陷小鼠，NRG，NOD.Cg-Rag1-/-l2rg-/-
模型制作方法	1.实验动物 NRG小鼠：NOD-scid小鼠敲除Rag1和Il2rg，购于美国实验室。饲养场所：中国医学科学院医学实验动物研究所SPF动物房的隔离器。实验场所：生物安全三级动物实验室 2.试剂 Histopaque（1.077g/ml）淋巴细胞分离液 CD34+HSC分离试剂盒抗小鼠 PE-CD45 抗人 APC-CD3 抗人 APC CY7-CD45 无血清干细胞培养基麻醉剂：三溴乙醇抗病毒药物cART：TFV+FTC+DTG 3.HIV病毒：JRCSF 4.仪器和耗材生物安全柜低温高速离心机倒置显微镜 0.5 mL胰岛素注射器 5.细胞脐带血来自合作医院或者脐血库（具有伦理证明）。根据用CD34纯化干细胞试剂盒，纯化脐带血中造血干细胞，纯化的细胞当天移植。 6.移植 1）选取新生鼠或者4周雌鼠，用X-RAY辐照仪照射，剂量是 1.5Gy。 2）将纯化的 CD34+造血干细胞尾静脉注入照射后的小鼠体内，每只小鼠注射1×10e5 细胞。 3）12周后，采血检测人细胞的比例：抗小鼠 PE-CD45；抗人 APC CY7-CD45；抗人 APC-CD3。 7.HIV病毒感染 1）麻醉小鼠，用HIV病毒，静脉感染。 2）感染4周后，检测HIV病毒的RNA。 8.HIV病毒感染后，用抗病毒药物cART治疗 1）制备含有TFV+FTC+DTG抗病毒药物的饲料 2）HIV感染4周后，检测人源化小鼠确定有HIV病毒，并且HIV load>10e5，开始用含有抗病毒药物的饲料。 2）治疗4-6周，检测HIV病毒的RNA。 9.动物IACUC：YHS19003-于海生-HIV感染的人源化小鼠模型
模型表型数据	1.造血干细胞纯化 CD34+细胞的纯度，流式染色在90%以上（见人源化小鼠构建）。 2.病原学检测感染人源化小鼠4周后，采小鼠外周血，检测血浆中的HIV病毒，可以明显检测到HIV RNA，说明HIV在人源化小鼠中复制，见下图A。 3.HIV感染后临床表现感染人源化小鼠4周后，采小鼠外周血，检测人CD4和CD8细胞的比例，可以明显检测到CD4 T细胞比例的降低，这与HIV病毒感染后，表现出的艾滋病症状，见下图B。 4.HIV感染后病理表型感染人源化小鼠4周后，生物安全柜中取胸腺、脾脏、骨髓和淋巴结，用多聚甲醛固定后，组化染色HIV的病毒蛋白P24，结果显示器官中有HIV病毒粒子。 5.cART治疗表型 HIV感染4周后，检测人源化小鼠确定有HIV病毒，并且HIV load>10e5，开始用含有抗病毒药物的饲料。治疗4-6周，检测外周血以及淋巴组织的HIV病毒的RNA。结果显示，用cART治疗HIV感染的人源化小鼠后，明显见到病毒载量的下降和CD4 T的保护，即CD4/CD8比值的升高，如图所示。
动物模型的评价与验证
保存方式
合作方式
相关文章	1. Cheng L, Yu H, Li G, Li F, Ma J, Li J, Chi L, Zhang L, Su L. (2017). "Type I interferons suppress viral replication but contribute to T cell depletion and dysfunction during chronic HIV-1 infection." JCI Insight 2(12). 2. Cheng L, Ma J, Li J, Li D, Li G, Li F, Zhang Q, Yu H, Yasui F, Ye C, Tsao LC, Hu Z, Su L, Zhang L. (2017). "Blocking type I interferon signaling enhances T cell recovery and reduces HIV-1 reservoirs." J Clin Invest 127(1): 269-279.
备注

高级检索