标识符 | CSTR:16397.09.0F01001019 |
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资源中文名称 | 非酒精性脂肪肝病小鼠高脂饮食诱导模型 |
资源英文名称 | HFD-induced Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in mice |
疾病概述 | 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征在肝脏的表现形式,与肥胖 、胰岛素抵抗(IR) 、空腹高血糖症、血脂异常、脂肪因子变异等机体代谢异常明显相关,是目前慢性肝病最常见的病因。NAFLD是以过量的脂质在肝细胞内堆积为特征的连续疾病谱,可由单纯的肝脂肪性变性发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH),严重时可发展为肝纤维化和肝硬化 ,NASH一旦合并肝纤维化或肝硬化则可进一步增加肝细胞癌(HCC)的发生风险。 到目前为止,NAFLD的确切发病机制尚不清楚,也缺乏特异性的治疗措施,因此针对发病机制和潜在治疗药物的研究是目前该领域的热点。动物模型可通过模拟不同的病因以及NAFLD每个阶段的组织病理学和病理生理学改变,为了解NAFLD发病机制和进展提供关键性的指导。 |
实验动物背景信息 | 6周龄C57BL/6J雄性小鼠, 16-18 g。 |
模型制作方法 | 1 实验材料 1.1 实验动物 选择40 只健康雄性C57BL /6 小鼠,体质量16-18 g,均购于北京唯尚立拓科技有限公司,实验动物许可证号:SCXK(京) 2016-0009,饲养于中国医学科学院实验动物研究所动物房内,5只/盒,温度( 22±2) ℃,湿度50% ~ 60%,12 h 循环照明,小鼠自由摄取食、水。 1.2仪器与试剂 1)全自动生化分析仪用于检测三酰甘油( triglyceride, TG) 、总胆固醇( total cholesterol, TC) 、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL) 等生化指标。2)石蜡包埋机( LEICA)。3)高脂饲料主要营养物质含量:60% 脂肪、20%碳水化合物和20%蛋白质 2 方法 2.1 动物模型制备 采用高脂饮食诱导NAFLD模型,造模用饲料货号为MD12033( 60% 脂肪、20%碳水化合物和20%蛋白质) ,购自江苏美迪森生物有限公司,持续造模12周,并在第6 周、9周和12 周分别进行糖耐量和胰岛素耐量测定,检测模型小鼠是否发生糖耐量受损,从而判断模型进展。 2.2 标本采集及处理 在实验结束后,称取小鼠体质量,用1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,仰卧位置于动物实验台上,固定四肢,脱毛后暴漏胸腹部,采用腹主动脉采血方法。室温静置30 min后,3,000 rpm,4°C离心15 min,分离血清,测定血脂水平。解剖小鼠腹腔,肉眼观察肝脏大体形态,在肝右叶同一位置切取1 块0.5 cm × 0.5 cm ×0.3 cm肝组织,滤纸吸干后称质量,其中一块进行及时冰冻切片,用于油红O染色。其余肝组织分装于1.5 mL 离心管中,-80℃低温保存。 |
模型表型数据 | 1 肝脏大体形态变化
2 肝脏脂肪水平指标检测
4 血清脂质水平检测
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动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
合作方式 | |
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[1] Yang Y,Li W,Liu Y,et al.Alpha-lipoic acid improves high-fat diet-induced hepatic steatosis by modulating the transcription factors SREBP-1, FoxO1 and Nrf2 via the SIRT1/LKB1/AMPK pathway.J Nutr Biochem 2014;25:1207-1217.DOI:10.1016/j.jnutbio.2014.06.001. [2] Li W,Li Y,Wang Q.Crude extracts from Lycium barbarum suppress SREBP-1c expression and prevent diet-induced fatty liver through AMPK activation.Biomed Res Int 2014;2014:196198. DOI:10.1155/2014/196198. [3] Jia L,Li W,Li J,et al.Lycium barbarum polysaccharide attenuates high-fat diet-induced hepatic steatosis by up-regulating SIRT1 expression and deacetylase activity.Sci Rep 2016;6:36209.DOI:10.1038/srep36209. |
备注 |