1.C57bL/6J小鼠 ，专业名称：C57bL/6J，近交系（Inbred Rat）

品系来源 ：1921年 C.C.Little用 Lathrop小鼠作近亲培育时，用No7雄鼠和No.52雌鼠交配，培育成C57。在C57中将毛色呈黑色的进行固定，培育成C57BL。1937年Ltle将维持的C57BL第六组亚系定名为C57BL6，将第十组亚系定名为C57BL10，继而分别维持至今。1947年从 Little引入到美国 Jackson Lab，形成C57BL/6J:1951年从 Jackson Lab将第32代引入到NH，形成c57BL6N亚系；1974年 Charles River从NH引入并于1975年进行了剖腹产。六十年代从 Jackson Lab引入到日本实验动物中央研究所,1986年自日本实验动物中央研究所引入到中科院上海实验动物中心。2001年中国北京维通利华从美国 Charles River引入第59代核心群。

2.盐敏感大对照鼠SS-13BN Rat，专业名称：SS-Chr13BN/McwiCrlVr，Ø同类系（Consomic Rat） 

诱导方法：自制气管滴注导管，动脉导管( 内径0.28mm, 427401, BD Intramedic PE Tubing)，长度4cm，插入端加热制成一定弧度， 动物麻醉后颈前暴露气管，充分暴露喉部以及声门，配合冷光源的使用，可见光源由声门处透射出并随声门开合呈现闪烁感( Fig2A)；于声门张开瞬间，右手持导管向前上方平稳插入气管，有轻微突破感，拔出导丝，调整导管向左侧弯曲，缓慢向气管深处插入，深至距小鼠上门牙约2.8cm以确保导管末端置于左主支气管内，末端连接胰岛素注射器，向导管内缓慢推注0.1M浓度盐酸或生理盐水对照），推注过程大于10s，再补推注入约30倍液体体积的空气。竖直放置小鼠5min，术后小鼠给予保温措施等待苏醒，密切观察至72h，存活动物为成功造模动物。

1.左肺弥漫性出血、渗出，而右肺损害不明显，

Fig1 肺部大体解剖

2 肺泡灌洗液白细胞计数和蛋白浓度、肺湿干重比结果见表3~5。I ) 盐酸组与生理盐水组比较，肺泡灌洗液中白细胞计数呈显著增加；除30 min时间点， HCl组与相对应的各个时间点NS组的比较，其差异有统计学意义(P＜0.05)，并在6 hHCl组达到峰值(P值＜0.01)。II ) 肺泡灌洗液蛋白浓度6 h NS组时BALF蛋白浓度出现轻度升高(P值＜0.05 vs 12 h组)；HCl刺激6 h时达峰值并明显高于6 h NS组及其它时间点HCl 组。III )左肺肺湿干重比值(W/D)在HCl刺激30 min时明显升高，12 h达峰值后呈下降趋势，至24小时进一步恢复。

Tab 3   各组BALF WBC (×10^7/L x±s)

*P值＜0.01 vs相应时间点NS组; #P值＜0.05 vs 2 h组; ▲P值＜0.05 vs 12 h组

Tab 4  各组BALF蛋白浓度 (μg/μl x±s)

*P值＜0.01 vs相应时间点NS组; #P值＜0.05 vs 2 h组; ▲P值＜0.05 vs 12 h组vs 24 h组

Tab 5 各组肺湿干重比 W/D  (% x±s)

*P＜0.01 vs相应时间点NS组; #P值＜0.05 vs 6 h组

TNF-α、IL-6、IL-1β和NF-κB免疫印迹检测

NS组各时间点组肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β和NF-κB的蛋白表达量无显著差异， HCl组6、12和24 h显著升高( P值＜0.01 vs NS组)，在12 h HCl组达到峰值( P＜0.05 vs 6 h 、24 h HCl组，Fig2)；肺组织IL-6蛋白表达量比较HCl组30 min开始显著升高( P＜0.01 vs NS组)， 6 h HCl组达到峰值(  P＜0.01 vs NS组，P＜0.05 vs 30 min、24 h HCl组，Fig3)；肺组织IL-1β 蛋白表达量比较，HCl组30 min开始显著升高( P＜0.05 vs NS组)，在6 h HCl组达到峰值( P＜0.05 vs NS组， P＜0.05 vs 2 h、24 h HCl组，Fig4)；肺组织NF-κB蛋白表达量比较，HCl组30 min开始升高，在2 h、6 h和12 h HCl组表达量显著升高( P＜0.05 vs NS组，Fig5)。

Fig2  小鼠肺组织TNF-α 表达水平  *P值＜0.05 vs NS组, #P值＜0.05

Fig3  小鼠肺组织IL-6表达水平  *P值＜0.05 vs NS组, #P值＜0.05

Fig4  小鼠肺组织IL-1β 表达水平  *P值＜0.05 vs NS组, #P值＜0.05

Fig5  小鼠肺组织NF-κB表达水平  *P值＜0.05 vs NS组

1.病理学结果及肺损伤评分

NS组各时间点肺组织观察可见肺泡结构完整、清晰，无损害( Fig6 )；30 min HCl 组的肺组织未见明显损害或轻微损害，肺泡结构较完整, 肺泡间隔无明显水肿，有少量炎性细胞浸润( Fig6B)；2 h HCl组，弥漫性肺泡壁增厚、红细胞渗出和炎性细胞浸润( Fig6D黑色箭头所示)；6 h HCl组，肺组织损害显著，肺组织弥漫性的出血、水肿，肺泡壁增厚、结构紊乱，部分肺泡萎陷不张( Fig6F黑色箭头所示)；12 h HCl组较6 h HCl组损害程度减轻，肺间质轻中度水肿，肺泡结构破坏程度以及炎性细胞浸润较6 h组减轻( Fig6H黑色箭头所示)；24 h HCl组，肺组织水肿充血程度仍然较重，与6、12 h组相比肺部炎症程度较轻( Fig6J黑色箭头所示)。HCl 组与NS组各个时间刺激点相比较， (除外30 min) 的肺组织病理损伤评分显著升高，且差异有统计学意义(P＜0.001)；并且HCl组，6 h HCl 组肺损伤评分与2 h、12 h HCl组比较显著升高，且差异有统计学意义(P值＜0.05)。

Fig6 小鼠肺病理学改变 (H&E染色  ×400)

Fig7 肺损伤评分  与NS组比较显著升高 *P值＜0.001；6h组与2 h、12 h HCl组比较显著升高 #P值＜0.05；

2. 肺组织免疫组化结果

CD3为T淋巴细胞膜表面标记物，12 h HCl 组可见肺间质出现T淋巴细胞(CD3+)(Fig8H)，24 h时仍大量存在( Fig8J)；以CD68为细胞膜表面标记物的巨噬细胞，在6 h HCl 组的肺间质出现( Fig9F)，至24 h时仍然大量存在( Fig9J)；Gr-1主要为粒细胞膜表面标记物，30 min HCl 组开始在肺泡间质出现，部分与肺泡壁黏附，至24 h时仍然大量存在(Fig10)。

Fig8  肺组织CD3免疫组化-T淋巴细胞 (×400)

Fig9  肺组织CD68免疫组化-巨噬细胞 (×400)

Fig10  肺组织Gr-1免疫组化-嗜中性粒细胞 (×400)

呼吸功能(Pehn)： HCl刺激小鼠6-12 h时出现Pehn明显升高，提示起到阻力显著增加

Tab 6  各组呼吸功能 Pehn  (x±s)

*P值＜0.01 vs相应时间点NS组; #P值＜0.05 vs 2 h组; ▲P值＜0.05 vs 24 h组