English

高级检索

数据导出
分享到:
标识符 CSTR:16397.09.0I01001194
资源中文名称 高表达P2X7受体的ICN1诱导的小鼠淋巴细胞白血病模型
资源英文名称
疾病概述 急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生的恶性肿瘤性疾病。异常增生的原始细胞可在骨髓聚集并抑制正常造血功能,同时也可侵及骨髓外的组织,如脑膜、淋巴结、性腺、肝等。ALL儿童期(0~9岁)为发病高峰,可占儿童白血病的70%以上。ALL在成人中占成人白血病的20%左右。临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等。
实验动物背景信息

SPF级6-8周龄鼠,C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

模型制作方法
1.病毒准备

细胞:293T

表达载体:MSCV- ICN1 -IRES-GFP,MSCV- P2X7 -IRES-BFP。

2.实验动物

可使用SPF级别的6-8周龄鼠, C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

3.细胞准备:

取B6.SJL小鼠的骨髓细胞,利用C-kit+磁珠,富集C-kit+造血干祖细胞

4.病毒感染

富集的小鼠C-kit+造血干祖细胞,体外感染表达MSCV- ICN1 -IRES-GFP的逆转录病毒,感染后培养48h。

5.细胞回输

感染后的C-kit+造血干祖细胞利用流式细胞仪分选出GFP+的细胞,通过尾静脉注射到致死剂量照射C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+细胞的比例。

6.病毒二次感染及回输

当检测到小鼠外周血GFP+细胞的比例超过50%,处死小鼠,取小鼠骨髓细胞,
分选出GFP+细胞,体外感染表达MSCV- P2X7 -IRES-BFP的逆转录病毒,感染后培养48h, 通过尾静脉注射到C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+ BFP+细胞的比例。

7.模型分析指标
(1)症状观察

细胞回输后小鼠症状表现为:竖毛、弓背。

(2)流式检测

在细胞回输后的一周后,每周检测外周血GFP+ BFP+细胞的比例,有出现GFP+ BFP+细胞,即为模型成功。

模型表型数据 动物症状观察

表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。

动物模型的评价与验证
保存方式
合作方式
相关文章
备注