标识符 | CSTR:16397.09.0I01001193 |
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资源中文名称 | 高表达M-CSF选择性剪接体的MLL-AF9诱导的小鼠髓细胞白血病模型 |
资源英文名称 | |
疾病概述 | 急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等 |
实验动物背景信息 | SPF级6-8周龄鼠,C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。 |
模型制作方法 | 1.病毒准备
细胞:293T 表达载体:MSCV- MLL-AF9 -IRES-GFP,MSCV- M-CSF -IRES-BFP。 2.实验动物
可使用SPF级别的6-8周龄鼠, C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。 3.细胞准备:
取B6.SJL小鼠的骨髓细胞,利用C-kit+磁珠,富集C-kit+造血干祖细胞 4.病毒感染
富集的小鼠C-kit+造血干祖细胞,体外感染表达MSCV- MLL-AF9 -IRES-GFP的逆转录病毒,感染后培养48h。 5.细胞回输
感染后的C-kit+造血干祖细胞利用流式细胞仪分选出GFP+的细胞,通过尾静脉注射到致死剂量照射的C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+细胞的比例。 6.病毒二次感染及回输
当检测到小鼠外周血GFP+细胞的比例超过50%,处死小鼠,取小鼠骨髓细胞, 7.模型分析指标
(1)症状观察
细胞回输后小鼠症状表现为:竖毛、弓背。 (2)流式检测
在细胞回输后的一周后,每周检测外周血GFP+ BFP+细胞的比例,有出现GFP+ BFP+细胞,即为模型成功。 |
模型表型数据 | 1.动物症状观察
表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。 2.细胞表型
流式检测结果显示,细胞免疫表型为CD3-B220-Gr-1+CD11b+ |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
合作方式 | |
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备注 |