SPF级的MSG1基因敲除小鼠，C57BL/6j小鼠

设计并构建MSG1的sgRNA，进行体外细胞水平测试sgRNA活性，设计并构建Donor载体，显微注射和移植，待F0代小鼠出生后鉴定小鼠基因型，选择阳性小鼠继续繁育。

6周龄雄性的MSG1基因敲除小鼠和野生型小鼠饲喂45%脂肪含量的高脂饲料，同时设置正常饲料组作对照。

分别饲喂MSG1基因敲除小鼠和对照小鼠45%脂肪含量的高脂饲料(HFD) 和常规对照饲料(SD)，喂食14周。期间每周测量小鼠体重并做好记录，给予高脂饲料12周后测量葡萄糖耐量（GTT）和胰岛素耐量（ITT）、代谢笼、食物摄入量等生理指标（图1）。结果显示MSG1基因敲除小鼠显著抵抗高脂饮食诱导的肥胖。具体表现为：与对照小鼠相比体重减轻、脂肪组织量减少、糖代谢改善、代谢率提高且不受进食量及运动量影响。

图1: MSG1基因敲除小鼠抵抗高脂诱导的肥胖表型。A 体重；B 骨骼肌组织重；C 脂肪组织重；D GTT；E ITT；F 能量消耗；G 二氧化碳呼出量；H 运动量；I 食物摄入量。

脂肪组织进行H.E.染色，统计脂肪细胞大小及脂滴大小并检测代谢相关基因（图2）。结果发现MSG1基因敲除小鼠脂肪细胞体积显著减小且发生棕色化现象。骨骼肌脂质含量检测及骨骼肌代谢能力评估，结果发现MSG1基因敲除小鼠骨骼肌组织氧化代谢能力增强（图3）。

图2: MSG1基因敲除小鼠脂肪组织表型及代谢基因检测。A H.E.染色；B-D qPCR检测代谢基因；E 脂肪组织UCP1免疫组化；F 脂肪组织Western Blot。

图3: MSG1基因敲除小鼠骨骼肌组织代谢基因检测。A-C qPCR检测代谢基因。