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标识符 CSTR:16397.09.0C09000029
资源中文名称 H5N1禽流感病毒布氏田鼠模型
资源英文名称
疾病概述 禽流感依据其对禽类的致病能力大小可以分为三个程度:高致病性、低致病性和无致病性。其中高致病性禽流感包括H5和H7 两个亚型。但并非所有的H5 和H7 都是强毒株。人高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒某些亚型的毒株引起的人急性呼吸道传染病。由H5N1亚型禽流感引起的症状较重,病死率高。1997年,香港一名3岁的男童因感染禽流感而死亡,在随后的几个月中,共有18个人感染禽流感病毒,其中6人死亡。之后相继有 H9N2、H7N7亚型禽流感感染人类和 H5N1 亚型再次感染人类的报道,禽流感与人禽流感的关系开始倍受关注。2003年12 月中旬开始至今,朝鲜、越南、泰国、韩国、日本和中国等10 余个亚洲国家先后暴发H5N1高致病性禽流感疫情, 并且再越南、泰国、柬埔寨以及印度尼西亚出现了人感染高致病性禽流感病毒病例。据最新资料报道,世界卫生组织已证实泰国、越南和柬埔寨以及印度尼西亚自2004年1月起截至到2005年8月20日共有112人感染,其中导致57人死亡。而H7N7感染引起的症状相对较轻仅以眼角结膜炎和轻微的呼吸道症状为主。追溯历史,有报道的第一次禽流感感染人的事件发生在上个世纪的70-80年代的几例以自限性结膜炎为临床特征的H7N7感染病患。最近的一次发生在2003年荷兰一家农场有近80名工人及家属被确诊为H7N7感染,他们以眼部感染和呼吸道症状为主,其中一名兽医死亡,他的家人未接触病禽但也被证实H7N7感染。这起事件具有有限的人传人的证据。
实验动物背景信息

布氏田鼠模型非常似隐性感染,可用于了解感染和致病的关系。制作流感病毒感染动物模型多应用SPF级布氏田鼠,6周龄。

模型制作方法

病毒株为A/Vietnam/1194/2004,布氏田鼠经过轻度麻醉后滴鼻感染病毒。感染后观察14天,监测存活率及体重变化率。感染后2、4、6、8天处死田鼠,取田鼠肺组织,进行病毒载量检测和组织病理学检查。

模型表型数据
1.布氏田鼠感染H5N1情况总计

滴鼻方式攻毒的田鼠肺部H5N1检出率较高(66.7%或者100%),且肺部均出现病理改变,接种病毒滴度较高的一组出现了较高的死亡率(66.7%)(表1)。

表1 布氏田鼠感染H5N1后情况

布氏田鼠

感染途径和剂量

RT-PCR

(天)

病毒分离(天)

病理改变

临床

3只

鼻腔/101

2/3

  2/3

不明显

3只

鼻腔/102

3/3

  3/3

2/3死亡

3只

腹腔/102

0/3

  0/3

不明显

 

2. 布氏田鼠体重变化

幼年和成年不是田鼠在感染后体重基本呈现续增长(表2)。

表2 布氏田鼠感染后体重变化

 

幼年动物

成年动物

 

实验前

38.9±12.6

55.9±5.2

攻毒2天

42.6±12.8

60.5±9.1

攻毒4天

45.2±17.0

61.1±10.9

攻毒6天

50.8±16.0

63.3±4.7

攻毒8天

42.3

58.6

 

3. 布氏田鼠全血白细胞计数情况

布氏田鼠感染H5N1病毒后,血液中白细胞总数在感染后第3天出现一过性升高(图2)。

 

图2 布氏田鼠白细胞变化曲线

4.布氏田鼠感染后尸检情况

布氏田鼠感染H5N1后不同时间的肺部组织均能分离出H5N1病毒RNA;成年田鼠在感染后2、4、6天肺部能分离出病毒,幼年田鼠感染后2、4天肺部能分离出病毒;血清中H5N1抗体未在感染后2、4、6、8天检出(表3)。

表3 布氏田鼠感染后肺部病毒检测

动物号

尸检天数

RT-PCR

Virus Isolation

血清抗体滴度

成年攻毒1#

2

+

+

-

成年攻毒3#

4

+

+

-

成年攻毒9#

6

+

+

-

成年攻毒13#

8

+

-

-

幼年攻毒2#

2

+

+

-

幼年攻毒5#

4

+

+

-

幼年攻毒11#

6

+

-

-

幼年攻毒14#

8

+

-

-

 

5.布氏田鼠肺部病理

成年或者幼年布氏田鼠感染H5N1后肺部均呈现出明显的肺泡间隔增宽和炎性渗出(图3)。

 

图3 布氏田鼠肺部病理(H&E)

动物模型的评价与验证
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