| 标识符 | CSTR:16397.09.0C01000791 | ||||||||||||||||||
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| 资源中文名称 | H5N1禽流感病毒气溶胶吸入感染雪貂模型 | ||||||||||||||||||
| 资源英文名称 | |||||||||||||||||||
| 疾病概述 | 禽流感依据其对禽类的致病能力大小可以分为三个程度：高致病性、低致病性和无致病性。其中高致病性禽流感包括H5和H7 两个亚型。但并非所有的H5 和H7 都是强毒株。人高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒某些亚型的毒株引起的人急性呼吸道传染病。由H5N1亚型禽流感引起的症状较重，病死率高。1997年，香港一名3岁的男童因感染禽流感而死亡，在随后的几个月中，共有18个人感染禽流感病毒，其中6人死亡。之后相继有 H9N2、H7N7亚型禽流感感染人类和 H5N1 亚型再次感染人类的报道,禽流感与人禽流感的关系开始倍受关注。2003年12 月中旬开始至今,朝鲜、越南、泰国、韩国、日本和中国等10 余个亚洲国家先后暴发H5N1高致病性禽流感疫情, 并且再越南、泰国、柬埔寨以及印度尼西亚出现了人感染高致病性禽流感病毒病例。据最新资料报道，世界卫生组织已证实泰国、越南和柬埔寨以及印度尼西亚自2004年1月起截至到2005年8月20日共有112人感染，其中导致57人死亡。而H7N7感染引起的症状相对较轻仅以眼角结膜炎和轻微的呼吸道症状为主。追溯历史，有报道的第一次禽流感感染人的事件发生在上个世纪的70-80年代的几例以自限性结膜炎为临床特征的H7N7感染病患。最近的一次发生在2003年荷兰一家农场有近80名工人及家属被确诊为H7N7感染,他们以眼部感染和呼吸道症状为主,其中一名兽医死亡,他的家人未接触病禽但也被证实H7N7感染。这起事件具有有限的人传人的证据。 | ||||||||||||||||||
| 实验动物背景信息 | 雪貂呼吸道解剖结构上下呼吸道分腔明显，受体分布与人极为接近，是迄今为止最为敏感的流感病毒感染动物模型。它对人流感病毒高度易感，病毒不经适应即能使雪貂致病，并易传播给雪貂和人。在自然条件下，雪貂一般也是通过呼吸道吸入病毒的方式感染流感病毒，其感染后的发病过程和机体反应也与人体相似。雪貂除对人流感病毒高度易感外，对禽流感、猪流感病毒也十分敏感，且感染后出现典型症状。 |
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| 模型制作方法 | 病毒株为A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011和A/Vietnam/1194/2004禽流感病毒，经血凝抑制（HI）实验，筛选出6月龄以下对当下流行的H1N1、H3N2、H5N1、H7N9亚型流感病毒相应血清抗体均为阴性的去势雪貂。为了使动物适应并降低应激反应，所有雪貂均在感染前一周进行体温芯片的皮下植入和实验室适应（使用扫描仪监测体温，BMDS, USA）。感染组通过肌肉注射盐酸塞拉嗪对雪貂进行麻醉，轻度麻醉后感染组每只雪貂经鼻接种病毒。传播实验是在笼子中进行的，该笼子旨在防止动物之间的直接接触，但允许已接种的雪貂与相邻的幼稚雪貂之间保持气流。两组三只雪貂经鼻内接种10 4 TCID 50病毒400uL；一组接种了A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011病毒，另一组接种了A/Vietnam/1194/2004病毒。在感染后第24小时，将每只接种过的动物和幼稚的雪貂分别饲养在传播笼中，以测试病毒的传播能力。观察所有动物的临床体征，每天称重作为疾病的指标。分别在感染后第1、3、5、7和9天或暴露后从已接种和未接种过的动物收集鼻拭子和咽拭子，并转移至1 ml PBS中。通过在MDCK细胞中的终点滴定确定病毒滴度。 |
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| 模型表型数据 | 1.雪貂临床表现
两组三只雪貂经鼻内接种10 4 TCID 50病毒：一组接种A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011病毒，另一组接种A/Vietnam /1194/2004病毒。观察动物的临床体征，并每天称重以。两种病毒均使雪貂出现打喷嚏、耸毛、嗜睡和食欲下降。一只接种了A/Vietnam/1194/2004病毒的雪貂在接种病毒4天后死亡； A/wild bird /Hong Kong/ 07035-1/2011病毒感染的雪貂无死亡情况。攻毒后9天内，接种A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011病毒的动物体重下降峰值为10.3％，而接种A/Vietnam/1194/2004病毒的动物体重下降峰值为27.8％（表1，图1）。
表1 A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011感染雪貂的临床症状和排毒情况
图1 感染雪貂体重
2. 雪貂排毒情况 对于这两种病毒，从上呼吸道排出的病毒始于感染后第1天，一直持续到感染后第7天。使用鼻拭子检测到的上呼吸道排毒水平，接种A/Vietnam/1194/2004病毒的动物拭子中病毒滴度明显高于接种A/wild bird/Hong Kong/07035-1/2011的动物毒（P <0.01）（图2）。 两种病毒都没有通过呼吸道飞沫从接种的雪貂传播到幼稚的雪貂。机载接触组的雪貂的鼻拭子或咽拭子中均未检测到病毒（图2））
图2 雪貂感染H5N1禽流感后鼻/咽拭子中病毒滴度
3. 传播组雪貂血清中H5N1抗体水平 根据HI分析，接触雪貂的恢复期血清（暴露后21天）对病毒特异性抗体阴性（表2）。 表2 传播组雪貂血清中H5N1抗体水平
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| 动物模型的评价与验证 | |||||||||||||||||||
| 保存方式 | |||||||||||||||||||
| 合作方式 | |||||||||||||||||||
| 相关文章 |
1. Xu L, Bao L, Yuan J, et al. Antigenicity and transmissibility of a novel clade 2.3.2.1 avian influenza H5N1 virus. J Gen Virol.2013 Dec;94(Pt 12):2616-26. 2. Lili Xu, Linlin Bao, Wei Deng, et al. Novel Avian-Origin Human Influenza A(H7N9) Can Be Transmitted Between Ferrets via Respiratory Droplets[J]. Journal of Infectious Diseases, 2014, 209(4):551-556. |
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| 备注 |
京公网安备 11010502043083号