标识符 | CSTR:16397.09.0F01001470 |
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资源中文名称 | 人体动脉粥样硬化肠道菌群移植小鼠模型 |
资源英文名称 | Human atherosclerosis intestinal microbiota transplantation mouse model |
疾病概述 | 动脉粥样硬化是由遗传、环境等多因素导致的老年多发性疾病,近年来有逐渐年轻化和上升趋势。随着社会的发展和生活水平的提高,感染性疾病所导致的死亡不断减少,而动脉粥样硬化疾病导致的死亡迅速增多,目前已成为全球人口死亡的首位原因。动脉粥样硬化的发病机理学说甚多,如脂质浸润学说、血栓源学说、血液动力学学说、中层平滑肌细胞增生学说、内膜损伤学说及受体学说等,现逐渐明确动脉粥样硬化的发病机理是复杂的,是综合性的较长过程。 |
实验动物背景信息 | C57BL/6 |
模型制作方法 | .实验材料 1.1实验动物 选择无特定病原体(SPF)级C57BL/6J小鼠,8-10周龄,体质量20-25g,按体重随机分组,健康对照组13只,动脉粥样硬化组12只,5只/盒饲养于SPF级屏障系统中,温度(22±2)℃,湿度50%~60%,12 h循环照明,小鼠自由摄取食、水。 1.2人类粪便样本 入选标准及研究分组:将生化指标正常的健康志愿者,作为对照组;将冠脉造影检查血管狭窄超过 50%或有明显颈动脉斑块的动脉粥样硬化患者作为动脉粥样硬化组。排除标准:排除消化系统无其它器质性疾病、消化道进行过手术者,排除有酗酒史、糖尿病、癌症、肾衰、中风等其它影响肠道菌群的疾病者,排除取样前 4 周服用益生菌、抗生素、非甾体类药物者。 样本采集过程:受试者参与样本采集和信息采集一次。采集受试者新鲜粪便, 按照使用说明书用粪便微生物基因组保护液套装采集后存储于-80℃,离心取上清液作为粪便移植液。 2.实验方法 2.1动物模型制备 取-80℃冻存的志愿者(对照组 7 例、动脉粥样硬化组人群 2 例)粪便于实验前一天放 4℃缓慢溶解。实验当日在无菌条件下将每组的多份样本混匀后称取2g,用40 mL无菌0.1 mol/LPBS(pH 7.2)溶解,振荡混匀后用无菌纱布 过滤粪便残渣后制成悬液。每只无菌小鼠经口灌胃接种0.4 mL,连续3天,建立粪菌移植模型。移植周期为10周,饲养在隔离环境内。 2.2标本采集及处理 实验期间每周称量小鼠体重,每2周取小鼠粪便进行16SRNA测序。并取实验终点的小鼠粪便进行宏基因组测序。实验结束后,对照组和动脉粥样硬化组小鼠颈动脉进行超声检测,同时测量射血分数等指标。水合氯醛腹腔注射麻醉,腹主静脉采血至死亡。全血EDTA抗凝,室温静置30 min后,3,000 rpm,4°C离心15 min分离血清,-80℃冰箱冻存。 解剖小鼠腹腔,取心、主动脉、肝、肠组织,滤纸吸干后称重、拍照。心、主动脉、肝、肠、部分组织福尔马林固定,后续OCT包埋进行油红O染色;剩余部分提取蛋白和RNA,-80℃冰箱冻存进行后续检测。部分肝脏组织冰冻切片包埋剂包埋并切片,进行病理染色。 |
模型表型数据 | |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | 冷冻 |
合作方式 | 不限定 |
相关文章 |
[1]de la Visitación, Néstor et al. “Gut microbiota contributes to the development of hypertension in a genetic mouse model of systemic lupus erythematosus.” British journal of pharmacology vol. 178,18 (2021): 3708-3729. doi:10.1111/bph.15512 [2]Chaix, Amandine et al. “Time-Restricted Feeding Reduces Atherosclerosis in LDLR KO Mice but Not in ApoE Knockout Mice.” Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology vol. 44,9 (2024): 2069-2087. doi:10.1161/ATVBAHA.124.320998 [3]“Puerarin alleviates atherosclerosis via the inhibition of Prevotella copri and its trimethylamine production.” Gut, gutjnl-2024-331880. 10 Jun. 2024, doi:10.1136/gutjnl-2024-331880 |
备注 | 该模型由首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心李晶博士提供 |