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标识符 CSTR:16397.09.0L02001100
资源中文名称 C1ql3基因敲入大鼠模型
资源英文名称 Wistar.ROSA26(tm-CAG-C1ql3)-GC/ILAS
疾病概述 痴呆症(dementia)患者在过去 10 年间从 2400 万增加到 4700 万,预测至2050 年全球痴呆患者将达到 1 亿 3 千万。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是痴呆症中最常见的类型。在 65 岁以上的老年人群中 AD 患病率达到5.56%,预测到 2050 年我国 AD 患者将达 3000 万。 AD 主要的病理特征包括由淀粉样蛋白(amyloid-beta, Aβ)沉积导致的胞外老年斑(senile plaques, SPs)聚集、胞内神经纤维缠结(intracellular neurofibrillary tangle)、胶质细胞应答(glia responses)、神经元丢失(neuronal loss)和突触丢失(synaptic loss)等。小胶质细胞在Aβ清除和AD病理发展进程中扮演重要角色。
实验动物背景信息

Wistar大鼠

模型制作方法

利用CRISPR/cas9介导的大鼠基因敲入技术,将CAG启动子驱动的C1QL3 cDNA敲入到ROSA26位点,建立定点转基因大鼠(KI)。

模型表型数据
1. 建立和鉴定

利用CRISPR/cas9介导的大鼠基因敲入技术,将CAG启动子驱动的C1QL3 cDNA敲入到ROSA26位点,建立定点转基因大鼠(KI)。提取对照和KI大鼠脑组织蛋白, western blot进行C1QL3蛋白表达鉴定,结果显示,和WT大鼠相比,KI大鼠脑组织高表达C1QL3蛋白。

1 KI大鼠构建策略和表达鉴定

2. 大体观察

KI大鼠比WT大鼠发育缓慢,消瘦,体重明显减少,但生育能力尚可。KI大鼠三月龄出现视力障碍并随年龄变得严重。

2 KI大鼠体重变化

动物模型的评价与验证

动物模型基因型鉴定

C1ql3基因敲入大鼠的基因型检测引物包括上游臂引物对R-rosa-C1QL3-up-F  

5’GGCGTTCAGGAAGATTATGGAGR-rosa-C1QL3-up-R  5’CGGGCCATTTACCGTAAGTTATG,以及下游臂引物对R-rosa-C1QL3-down-F  5’CCTCCTCTCCTGACTACTCCCAG R-rosa-C1QL3-down-R  5’ATTAACAGGAAATGGCTCAGTTTATAAATG

2 WB评价该基因在敲除大鼠的蛋白表达水平

提取仔代大鼠大脑组织总蛋白,进行免疫印迹,确认C1ql3在脑组织蛋白中过表达。

保存方式 冷冻
合作方式 不限定
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