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标识符 CSTR:16397.09.0C01000910
资源中文名称 绿色荧光标记人胰腺癌细胞SW1990皮下接种裸鼠肿瘤模型
资源英文名称
疾病概述 胰腺癌是一种恶性程度很高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤,约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%,是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌恶性度高,病程短,一般出现症状时已属晚期,并很快发生转移,侵犯邻近脏器。胰头癌与胰体尾癌的转移途径不完全一致,胰头部癌常侵犯到胆总管、十二指肠、胃及腹腔动脉,其淋巴转移途径主要是经肠系膜上动脉周围淋巴结向五动脉周围淋巴结转移。胰体、尾部癌常沿神经鞘向腹腔神经丛及脊髓方向转移,或沿淋巴管转移至胰上及肝门淋巴结等处。本病发病率男性高于女性,男女比率为1.5~2:1,男性患者远较绝经前的妇女多见,绝经后妇女的发病率与男性相仿。
实验动物背景信息

人胰腺癌细胞SW1990源自一位56岁的男性白人,人胰腺癌细胞株SW1990为高转移人胰腺癌细胞株,1978年取自一名58岁胰尾癌并脾转移的男性患者,CEA阳性,1979年患者死于肝转移。经组织培养,呈现上皮样细胞特征;接种裸鼠后,组织病理学上类似于原发癌,肿瘤呈现高分化的腺癌样生长。SW1990由美国学者Kyriazis 等建株,SW1990高肝转移的人胰腺癌细胞株具有侵袭力强、转移效率高和转移范围大的特点,常用来深入研究胰腺癌肝转移机理的理想细胞系。利用脂质体2000将绿色荧光标记表达载体chicken β-actin-GFP-NEO转染SW1990细胞,通过G418抗生素筛选到一株稳定高表达绿色荧光蛋白(GFP)的单克隆人胰腺癌细胞SW1990,命名为SW1990-eGFP, 该单克隆细胞在荧光显微镜下呈强荧光,荧光较均匀的分布于整个细胞内,传代数次后仍能稳定高水平表达GFP , 细胞形态和未转染细胞无明显区别(图1)。

图1   绿色荧光表达载体的构建和SW1990稳定高表达GFP的单克隆细胞株(200×)

模型制作方法

将对数生长期的SW1990-eGFP细胞皮下接种于2只BALB/c裸鼠,接种细胞数量为1×106/只, 采用活体荧光影像系统摄像动态观察。模型制作采用的BALB/c裸鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。

模型表型数据

分别在接种后的7、14、21、28、35d观察裸鼠皮下肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加,且具有很好的相关性(图2)。

图2,皮下接种SW1990-eGFP肿瘤生长影像分析

动物模型的评价与验证
保存方式 液氮冻存于中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室
合作方式
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备注